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tan123456

新虫 (初入文坛)

[求助] tricine-sds-page凝胶电泳一大堆问题。求帮忙解决 已有1人参与

最近在分析多肽,想跑tricine-sds-page电泳,可是跑了很多次,每次都是两天两天的做累都累死了,但是还是没一次成功。主要是一个下几个问题:
1)内槽的阴极缓冲液总是往外跑,不知道为什么。做之前用水测漏都没问题,一上电压就开始漏,然后过不了多久就断电停了,又得补阴极缓冲液才能重新开始,电压是30V,所以请问有什么办法可以避免漏吗?用的是天能的垂直电泳仪。
2)我的样品怎么在加到样品槽的时候会漂起来,跟泡泡混在一起,就这么直接就加不到槽里面漂在缓冲液面上,所以造成一大片污染,不知道怎么办。。。
3)一般电压选择多大,我是按照凝胶制备试剂盒说明书上写的,先30V 1小时,然后转100V,这样太慢了,真的好慢好慢,要好久好久。。。。
帮忙呀。。。求帮忙呀。
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real-times

新虫 (初入文坛)

T只分离胶浓度,就是我们常说的多大浓度的胶,C只交联度,是甲叉占的百分比,C越大,分子筛作用越明显,小肽一般是5%,常规是3.3%

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17楼2017-05-27 10:41:13
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15895812751

新虫 (初入文坛)

样品里面加甘油    可以让你的样品降下去    蔗糖也可以

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2楼2016-01-24 07:29:21
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15895812751

新虫 (初入文坛)

电压不需要那么小      我都是250V跑到结束

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3楼2016-01-24 07:30:00
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15895812751

新虫 (初入文坛)

可以的话拍张照片来     光用一段话  你表述不清楚 我们也不知道你错在哪

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4楼2016-01-24 07:31:25
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