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tricine-sds-page凝胶电泳一大堆问题。求帮忙解决 已有1人参与
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最近在分析多肽，想跑tricine-sds-page电泳，可是跑了很多次，每次都是两天两天的做累都累死了，但是还是没一次成功。主要是一个下几个问题： 1）内槽的阴极缓冲液总是往外跑，不知道为什么。做之前用水测漏都没问题，一上电压就开始漏，然后过不了多久就断电停了，又得补阴极缓冲液才能重新开始，电压是30V，所以请问有什么办法可以避免漏吗？用的是天能的垂直电泳仪。 2）我的样品怎么在加到样品槽的时候会漂起来，跟泡泡混在一起，就这么直接就加不到槽里面漂在缓冲液面上，所以造成一大片污染，不知道怎么办。。。 3）一般电压选择多大，我是按照凝胶制备试剂盒说明书上写的，先30V 1小时，然后转100V，这样太慢了，真的好慢好慢，要好久好久。。。。 帮忙呀。。。求帮忙呀。  |
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样品沉不下去可以多加点甘油，点样的时候枪头尖部不要有空气，不然点样会产生气泡，气泡浮起会把样品也带上去。电压应该是30V跑，等样品完全从孔里进到浓缩胶以后就可换成200V，全程200V直到快跑到底的时候再换成300V，其实换成200V以后，就是电压越大不同大小的蛋白分得越开，并不是电压小就好。这样全程2h左右。这样跑1KD和4KD的marker也能清晰分开，祝好运！ 发自小木虫IOS客户端 |
20楼2017-06-19 23:37:34
2楼2016-01-24 07:29:21
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