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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 膜蛋白纯化菜鸟一枚，向各位大侠请教一下纯化中的问题，蛋白为两次跨膜
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34100313

铜虫 (正式写手)

[求助] 膜蛋白纯化菜鸟一枚，向各位大侠请教一下纯化中的问题，蛋白为两次跨膜 已有1人参与

在大肠杆菌里表达一个动物膜蛋白的全长，buffer里没有加detergent，破碎后离心取上清，拿去测活性，加了对照，发现确实有活性，尚未过分子筛，所以不知道蛋白形成aggregation的比例，不知道后续纯化过程需不需要加detergent？
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1楼 2016-01-20 20:21:28
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34100313

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xfy821523052 at 2016-02-15 19:36:22
首先，要知道detergent加入有什么作用？如果对aggregation没啥影响和对活性没影响就可以加，我感觉如果没啥特殊功能就不要加了，和前期做的工作保持一致。

加detergent可以从膜中更多的提取到目的蛋白，且蛋白在detergent环境中更稳定
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3楼2016-03-03 15:44:39
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xfy821523052

金虫 (小有名气)

脉冲电场；食品加工

【答案】应助回帖

首先，要知道detergent加入有什么作用？如果对aggregation没啥影响和对活性没影响就可以加，我感觉如果没啥特殊功能就不要加了，和前期做的工作保持一致。

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-02-15 19:36:22
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