应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 关于eGFP表达问题
61/1返回列表
查看: 2659  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ljy525380

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于eGFP表达问题

这两天做实验遇到一个问题，转基因的绿色荧光蛋白不表达，想请教下大家。我在绿色荧光蛋白eGFP的N端连接有我的基因，C端融合有gus基因，我想问一下，这种情况是不是影响了eGFP蛋白的构象折叠，而导致荧光检测不到？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-01-18 16:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大鹏鸟100

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ljy525380: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-01-20 11:18:27
先看一下N端连上你的蛋白之后有没有破坏读码框吧，还有就是你的蛋白之前有没有kozak序列等，根据我的经验，只要不破坏读码框，一般没事
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-01-19 09:22:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljy525380

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大鹏鸟100 at 2016-01-19 09:22:05
先看一下N端连上你的蛋白之后有没有破坏读码框吧，还有就是你的蛋白之前有没有kozak序列等，根据我的经验，只要不破坏读码框，一般没事

谢谢，我的读码框没有问题，只是蛋白之前没有kozak序列，这样影响大么
赞一下 回复此楼
3楼2016-01-20 11:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大鹏鸟100

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ljy525380 at 2016-01-20 11:18:16
谢谢，我的读码框没有问题，只是蛋白之前没有kozak序列，这样影响大么...

质粒本身酶切位点之前也没有么？
赞一下 回复此楼
4楼2016-01-21 17:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huizhenli

新虫 (初入文坛)
请问楼主是转植物细胞吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-02-24 20:19:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mei921203

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大鹏鸟100 at 2016-01-19 09:22:05
先看一下N端连上你的蛋白之后有没有破坏读码框吧，还有就是你的蛋白之前有没有kozak序列等，根据我的经验，只要不破坏读码框，一般没事

在目的基因的C端连接GFP时，中间需要加Linker吗？我直接去掉终止密码子，然后紧跟着GFP的起始密码子ATG，会影响荧光信号吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2018-01-14 00:55:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ljy525380 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +32 2261744733 2026-04-11 33/1650 2026-04-15 22:03 by noqvsozv
[考研] 求助调剂，跨调 +19 X十甫寸Y 2026-04-11 20/1000 2026-04-15 21:18 by cuisz
[考研] 290调剂生物0860 +37 哇哈哈，。 2026-04-11 43/2150 2026-04-15 18:55 by zhuwenxu
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+6 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 28/1400 2026-04-14 15:44 by zs92450
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 2本，初试303，0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂，一志愿材料科学与工程985，365分， +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550， 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭