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ttxs99

木虫 (小有名气)

[求助] WB电泳成这样是为啥？ 已有9人参与

WB电泳成这样是为啥？
还能继续往后面做么？
怎么才能跑得好看呢？

WB电泳成这样是为啥？
P60118-121009.jpg


WB电泳成这样是为啥？-1
P60118-121108.jpg
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淡定
1楼 2016-01-18 12:23:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电泳胶没有配好吧，配好分离胶后充分混匀，尽快注入，配完分离胶之后，加一层水进去使其保持液面平整。
分离胶充分凝好之后再加浓缩胶
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ttxs99
3楼2016-01-18 12:53:12
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XMC-7

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.现在室温比较低，我们做胶时一般37℃培养箱放着凝固；2.电泳液中含SDS，天冷易析出的，所以将电泳液37℃水浴后使用，一直水浴更好了，我们是用的电磁炉保温功能；3.样品的Buffer中是否含有尿素、盐酸胍等变性剂，若有的话，容易扩散，一般是跑得很难看，同求大神指点，如何解决？
赞一下(1人) 回复此楼
能帮的帮，难事求助的心情咱也经历过
6楼2016-01-19 10:03:33
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普通回帖

xiangbchen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
底部胶与玻璃板结合不紧，部分蛋白样品从缝隙中漏掉了。

发自小木虫Android客户端
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ttxs99
2楼2016-01-18 12:52:01
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ttxs99

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-18 12:53:12
电泳胶没有配好吧，配好分离胶后充分混匀，尽快注入，配完分离胶之后，加一层水进去使其保持液面平整。
分离胶充分凝好之后再加浓缩胶

混的不能再匀了，试剂都一一加齐了，但是每次凝胶特别慢，不知是否有影响
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淡定
4楼2016-01-18 13:07:48
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ttxs99

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangbchen at 2016-01-18 12:52:01
底部胶与玻璃板结合不紧，部分蛋白样品从缝隙中漏掉了。

亲。。。这个问题如何解决啦？？
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淡定
5楼2016-01-18 13:15:44
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pengc201

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
7楼2016-01-19 10:07:03
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ttxs99

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by pengc201 at 2016-01-19 10:07:03
marker 看着分离的还挺好的。你是四度跑的吗？我的胶一般都是biorad买的现成的。所以不知道是不是配胶的问题。

是放在冰水混合物里电泳的。。。
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淡定
8楼2016-01-19 14:49:11
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小馨月

金虫 (著名写手)
啊呀

发自小木虫Android客户端
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9楼2016-01-19 14:55:18
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1010727538

木虫 (小有名气)
放一些高浓度的封底胶，之后再灌胶试试。这个季节温度很重要

发自小木虫Android客户端
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ttxs99
身在炼狱，心在天堂
10楼2016-01-19 15:03:04
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