| 查看: 327 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
lybio金虫 (正式写手)
|
[交流]
平端连接后鉴定方向的问题
|
||
| 实验中先用中间载体（载体中已连接一个基因片断，此基因片断中间有个酶切位点，酶切后与另一个DNA片断平端连接）上的引物P1、P4（即为已连接基因的 两端引物）和DNA片断引物P2、P3扩增质粒（六个菌液PCR为阳性的菌液中抽提的质粒），可得到预期片断（分别为3.0kb和1.0kb），验证了片断已经与载体连接上了。再通过载体的引物P1和片断的引物P3，以及片断引物P2和载体的引物P4分别扩增质粒，电泳结果用载体的引物P1和片断的引物P3都无P出条带，用片断引物P2和载体的引物P4扩增，四个质粒有条带，按常理说，只要有条带，不就证实连接方向正确嘛，如果连接方向不对，根本P不出条带。但问题是它们扩增的条带片断为0.9kb，不是预期片断大小2.0kb。想请教大伙出现这现象的原因，和其他鉴定方向的方法 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分
已经有5人回复
-
0856材料化工调剂 总分330
已经有9人回复
-
085602 化工专硕 338分 求调剂
已经有9人回复
-
352分 化工与材料
已经有4人回复
-
求调剂
已经有8人回复
-
材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分
已经有3人回复
-
材料求调剂一志愿哈工大324
已经有4人回复
-
085600 286分 材料求调剂
已经有4人回复
-
求调剂
已经有7人回复
-
275求调剂
已经有10人回复
lybio
金虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1315.9
- 散金: 20
- 帖子: 399
- 在线: 80.9小时
- 虫号: 284636
- 注册: 2006-10-14
- 性别: MM
- 专业: 生物化工与食品化工
6楼2008-10-05 17:08:48
2楼2008-10-03 19:46:45
lybio
金虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1315.9
- 散金: 20
- 帖子: 399
- 在线: 80.9小时
- 虫号: 284636
- 注册: 2006-10-14
- 性别: MM
- 专业: 生物化工与食品化工
3楼2008-10-03 22:53:19
chenliang_0513
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 贵宾: 0.01
- 金币: 8830.8
- 散金: 353
- 红花: 3
- 沙发: 3
- 帖子: 3036
- 在线: 347.9小时
- 虫号: 243880
- 注册: 2006-04-15
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
4楼2008-10-04 11:01:59
