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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 34KD蛋白跑不出来？
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longxu711712

木虫 (正式写手)

[求助] 34KD蛋白跑不出来？ 已有1人参与

我的目的蛋白是34KD，用10%的胶，也用过12%的胶，之前有过两次跑出来了，但是大多数时候跑不出来，每次转膜35KD的marker很淡或者没有，这是为什么？
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1楼 2016-01-15 21:02:26
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MarchZR

银虫 (小有名气)
考虑也有很能是你的蛋白表达量少吧，或者降解了，不要总是考虑胶的问题
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4楼2016-03-09 08:52:13
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dchqde

新虫 (小有名气)
上图说话

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2楼2016-01-16 07:25:58
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kop9831

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

34kD的蛋白就不要用低浓度的胶，你试试15%的，然后跑的时候溴酚蓝不要跑出去，跑到最底端就行，转膜的参数也要调整，湿转电流150-200mA，时间1.5-2小时，转完用考马斯亮蓝染一下胶看看残留。
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比较擅长做图，尤其是SCI投稿用的，常用工具：PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
3楼2016-03-07 14:37:16
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