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longxu711712

木虫 (正式写手)

[求助] 34KD蛋白跑不出来? 已有1人参与

我的目的蛋白是34KD,用10%的胶,也用过12%的胶,之前有过两次跑出来了,但是大多数时候跑不出来,每次转膜35KD的marker很淡或者没有,这是为什么?
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dchqde

新虫 (小有名气)

2楼2016-01-16 07:25:58
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kop9831

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

34kD的蛋白就不要用低浓度的胶,你试试15%的,然后跑的时候溴酚蓝不要跑出去,跑到最底端就行,转膜的参数也要调整,湿转电流150-200mA,时间1.5-2小时,转完用考马斯亮蓝染一下胶看看残留。
比较擅长做图,尤其是SCI投稿用的,常用工具:PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
3楼2016-03-07 14:37:16
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MarchZR

银虫 (小有名气)

考虑也有很能是你的蛋白表达量少吧,或者降解了,不要总是考虑胶的问题
4楼2016-03-09 08:52:13
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