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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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张胜博

新虫 (初入文坛)

[求助] 用的clontech RACE试剂盒,做不出来结果。跪求大家看看是我设计的引物有问题吗? 已有4人参与

GGCCGAAGCGGAAGTGCCACGACCACGCGCACTCCGAGAACGTCGCCGGC
GCCTCCGGTGGCCGCTGCCACTGCTCCAAGCGCAGGAAGTCCCGTGTGAA
GCGGATGACCCGCGTTCCGGCGATCAGCTCGAAGGCGGCGGAGATCCCCG
CGGACGACTTCTCGTGGCGCAAGTACGGGCAGAAGCCCATCAAGGGCTCC
CCCTACCCACGAGGCTACTACAAGTGCAGCACGGTGCGCGGTTGCCCGGC
GCGGAAGCACGTGGAGCGCGACCCCAGCGACCCGTCCATGCTCATCGTGA
CCTACGAGGGCGACCACCGCCACACCCCCGGCGACCAGGAACCGGCGGCG
GCGCTCACCCCGCTCCCGGAGCTGCACAAGCTCTGACTGAAGCTTCTTTC
TACCCACCGCTACTACACCGACCTGTTAATTAATTAATTAAAACTTAGCC
TGTCATGCTGTTCCCTTTGTCGCCGTATAGTAGTAGCTAGAGTTTCTTTT
TCTTTTTTGTTTGGTCGCTCGATCGATCCAGTGTATTAGTAGCAGCATGT
AAAAGAATGAGCAACTTAGGGAAGCTTTGAGCAGCTTTGGTCGGAGAAGA
AGAAAGAAGCGAGCGAAAGAAAAAGACGCGCAACTGCTCGTAGTTTTGAC
TGCAAA
这是基因序列片段,做的3RACE,我设计的GSP2引物序列为TGCTGTTCCCTTTGTCGCCGTAT  跪求大家看一看啊
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prthefu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

首先,我也是新手,刚做这方面。所以针对你的问题,我只是单纯发表一下我自己的理解。
你贴出了基因的部分序列,一般默认方向为5-3,所以,我在你这段序列(656bp)中先查找ORF,但是,得到的结果如下图1.我找到的是后面的终止密码子,但前面的起始密码子没有,所以,你要做的不应该是5'-race吗?为什么你要做3呢?
用的clontech RACE试剂盒,做不出来结果。跪求大家看看是我设计的引物有问题吗?
图1阅读框查找.jpg

nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
20楼2016-04-09 21:26:34
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Harper_sun

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
带了特定的15个碱基了没?

发自小木虫Android客户端
2楼2016-01-14 21:43:14
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Harper_sun

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是用的SMART试剂盒??

发自小木虫Android客户端
3楼2016-01-14 21:43:45
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张胜博

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Harper_sun at 2016-01-14 21:43:45
是不是用的SMART试剂盒??

是的,就按要求设计的。可是做不出来,怀疑是引物设计的不好
4楼2016-01-15 18:26:22
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