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用的clontech RACE试剂盒,做不出来结果。跪求大家看看是我设计的引物有问题吗? 已有4人参与
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GGCCGAAGCGGAAGTGCCACGACCACGCGCACTCCGAGAACGTCGCCGGC GCCTCCGGTGGCCGCTGCCACTGCTCCAAGCGCAGGAAGTCCCGTGTGAA GCGGATGACCCGCGTTCCGGCGATCAGCTCGAAGGCGGCGGAGATCCCCG CGGACGACTTCTCGTGGCGCAAGTACGGGCAGAAGCCCATCAAGGGCTCC CCCTACCCACGAGGCTACTACAAGTGCAGCACGGTGCGCGGTTGCCCGGC GCGGAAGCACGTGGAGCGCGACCCCAGCGACCCGTCCATGCTCATCGTGA CCTACGAGGGCGACCACCGCCACACCCCCGGCGACCAGGAACCGGCGGCG GCGCTCACCCCGCTCCCGGAGCTGCACAAGCTCTGACTGAAGCTTCTTTC TACCCACCGCTACTACACCGACCTGTTAATTAATTAATTAAAACTTAGCC TGTCATGCTGTTCCCTTTGTCGCCGTATAGTAGTAGCTAGAGTTTCTTTT TCTTTTTTGTTTGGTCGCTCGATCGATCCAGTGTATTAGTAGCAGCATGT AAAAGAATGAGCAACTTAGGGAAGCTTTGAGCAGCTTTGGTCGGAGAAGA AGAAAGAAGCGAGCGAAAGAAAAAGACGCGCAACTGCTCGTAGTTTTGAC TGCAAA 这是基因序列片段,做的3RACE,我设计的GSP2引物序列为TGCTGTTCCCTTTGTCGCCGTAT 跪求大家看一看啊 |
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【答案】应助回帖
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一般不会是引物设计的问题,如果你的第一链cDNA反转的没有问题,用Clontech的试剂盒很容易扩出来的。。给张你的PCR电泳图看看,是完全没有条带还是说你条带回收了,连接转化后测序是错误序列??如果TouchdownPCR没有条带可以试试最后一步降低退火到65度。。试剂盒的说明书里有详细说明。 发自小木虫Android客户端 |
13楼2016-01-18 17:35:04
Harper_sun
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2楼2016-01-14 21:43:14
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3楼2016-01-14 21:43:45
4楼2016-01-15 18:26:22









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