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流年相思

新虫 (小有名气)

[求助] MTT实验 已有2人参与

实验测的OD值好多都是一点几或二点几,所有的都是统一操作,是被污染了吗?OD多高为宜,求指教

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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好,但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱,作用时长有很大的关系,可以设计一个空白实验看看,祝好~
追求真理的道路上永远不会孤独
2楼2016-01-14 09:58:17
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普通回帖

chenweijlu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不是细胞多了 就是污染了,污染的可能很大,一般细胞孔长满了也就1多点
3楼2016-01-14 17:29:39
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流年相思

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-14 09:58:17
前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好,但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱,作用时长有很大的关系,可以设计一个空白实验看看,祝好~

谢谢!

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4楼2016-01-14 17:39:25
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流年相思

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenweijlu at 2016-01-14 17:29:39
不是细胞多了 就是污染了,污染的可能很大,一般细胞孔长满了也就1多点

中板的时候好像密度中大了,投毒前就几乎长满了!细胞太多也会使OD偏高?也就是说不是只被污染才会偏高对吧!

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5楼2016-01-14 17:43:52
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流年相思

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-14 09:58:17
前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好,但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱,作用时长有很大的关系,可以设计一个空白实验看看,祝好~

我想问一下,就是投毒前不是要把先前的培养液吸出来吗,我直接只用一个枪头吸出所有的孔内液体,这样可以吗?

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6楼2016-01-14 17:46:47
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

在MTT检测时实际上要求细胞大概能长满96-孔板的80-90%,细胞繁殖速度快,OD值也会相对偏大一些,MTT作用一段时间后,再吸出所有液体加DMSO,这时也不必要更换吸头,依次吸取就可以了,没事的
追求真理的道路上永远不会孤独
7楼2016-01-15 13:21:51
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chenweijlu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 流年相思 at 2016-01-14 17:43:52
中板的时候好像密度中大了,投毒前就几乎长满了!细胞太多也会使OD偏高?也就是说不是只被污染才会偏高对吧!
...

是的啊,MTT一般的标准是初始接种量1w个/孔,
8楼2016-01-15 16:01:59
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流年相思

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-15 13:21:51
在MTT检测时实际上要求细胞大概能长满96-孔板的80-90%,细胞繁殖速度快,OD值也会相对偏大一些,MTT作用一段时间后,再吸出所有液体加DMSO,这时也不必要更换吸头,依次吸取就可以了,没事的

非常感谢!

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9楼2016-01-15 23:58:38
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流年相思

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by chenweijlu at 2016-01-15 16:01:59
是的啊,MTT一般的标准是初始接种量1w个/孔,...

初次做,还不熟,要么种太多,要么种太少了,呵呵!

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10楼2016-01-15 23:59:40
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