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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MTT实验
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流年相思

新虫 (小有名气)

[求助] MTT实验 已有2人参与

实验测的OD值好多都是一点几或二点几，所有的都是统一操作，是被污染了吗？OD多高为宜，求指教

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1楼 2016-01-13 23:51:22
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好，但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱，作用时长有很大的关系，可以设计一个空白实验看看，祝好~
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追求真理的道路上永远不会孤独
2楼2016-01-14 09:58:17
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chenweijlu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不是细胞多了 就是污染了，污染的可能很大，一般细胞孔长满了也就1多点
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3楼2016-01-14 17:29:39
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流年相思

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-14 09:58:17
前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好，但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱，作用时长有很大的关系，可以设计一个空白实验看看，祝好~

谢谢！

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4楼2016-01-14 17:39:25
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流年相思

新虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by chenweijlu at 2016-01-14 17:29:39
不是细胞多了 就是污染了，污染的可能很大，一般细胞孔长满了也就1多点

中板的时候好像密度中大了，投毒前就几乎长满了！细胞太多也会使OD偏高？也就是说不是只被污染才会偏高对吧！

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5楼2016-01-14 17:43:52
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流年相思

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-14 09:58:17
前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好，但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱，作用时长有很大的关系，可以设计一个空白实验看看，祝好~

我想问一下，就是投毒前不是要把先前的培养液吸出来吗，我直接只用一个枪头吸出所有的孔内液体，这样可以吗？

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6楼2016-01-14 17:46:47
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

在MTT检测时实际上要求细胞大概能长满96-孔板的80-90%，细胞繁殖速度快，OD值也会相对偏大一些，MTT作用一段时间后，再吸出所有液体加DMSO，这时也不必要更换吸头，依次吸取就可以了，没事的
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追求真理的道路上永远不会孤独
7楼2016-01-15 13:21:51
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chenweijlu

铜虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by 流年相思 at 2016-01-14 17:43:52
中板的时候好像密度中大了，投毒前就几乎长满了！细胞太多也会使OD偏高？也就是说不是只被污染才会偏高对吧！
...

是的啊，MTT一般的标准是初始接种量1w个/孔，
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8楼2016-01-15 16:01:59
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流年相思

新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-15 13:21:51
在MTT检测时实际上要求细胞大概能长满96-孔板的80-90%，细胞繁殖速度快，OD值也会相对偏大一些，MTT作用一段时间后，再吸出所有液体加DMSO，这时也不必要更换吸头，依次吸取就可以了，没事的

非常感谢！

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9楼2016-01-15 23:58:38
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流年相思

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by chenweijlu at 2016-01-15 16:01:59
是的啊，MTT一般的标准是初始接种量1w个/孔，...

初次做，还不熟，要么种太多，要么种太少了，呵呵！

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10楼2016-01-15 23:59:40
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