应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切问题求助
191/2返回列表12下一页
查看: 2122  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 酶切问题求助

手里有一个工程菌，好几年前构建的，期间也提过质粒又转到表达菌里（传代次数不清楚了）。最开始做时，酶切后都只有目的基因一个小片段，现在酶切后，700bp下面都会多出一条带，请问一下是什么原因？酶切的条件也没有改变。请问大家这个该怎么办。是什么原因造成的？难道要重新构建合成么，才可以再酶切出只有目的基因一个小片段么？  质粒是pet-3C。双酶是ndeI 和Bham I，marker左边是2000，右边是10000的。500bp下面的是目的蛋白，现在是700bp下面也有片段被切出来。

酶切问题求助
1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
I am not a hero , but I served with heroes！
1楼 2016-01-12 11:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billie113
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-01-12 11:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tzynew
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
3楼2016-01-12 11:34:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomaya2046
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
4楼2016-01-12 11:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skyish
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
一

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-01-12 11:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ycsqubit
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
祝福

发自小木虫IOS客户端
6楼2016-01-12 11:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
7楼2016-01-12 11:53:01
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
8楼2016-01-12 11:53:58
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

疯子J-F
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
，，

发自小木虫Android客户端
9楼2016-01-12 11:56:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guanlianwu
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
10楼2016-01-12 11:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wlt728 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 18:22 by 7huP8NPKZCp9
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 6/300 2026-08-15 18:06 by 7huP8NPKZCp9
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +3 wangze12014 2026-08-14 4/200 2026-08-15 18:05 by babangida
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 7/350 2026-08-15 17:58 by 7huP8NPKZCp9
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 P4JhWrbJGjSe 2026-08-14 5/250 2026-08-15 15:46 by QXtWNz7PI7wZ
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 3/150 2026-08-15 14:53 by QXtWNz7PI7wZ
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 HFw0lei2R37i 2026-08-14 9/450 2026-08-15 11:33 by KxMI1BYBxWX1
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭