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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切问题求助
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 酶切问题求助

手里有一个工程菌，好几年前构建的，期间也提过质粒又转到表达菌里（传代次数不清楚了）。最开始做时，酶切后都只有目的基因一个小片段，现在酶切后，700bp下面都会多出一条带，请问一下是什么原因？酶切的条件也没有改变。请问大家这个该怎么办。是什么原因造成的？难道要重新构建合成么，才可以再酶切出只有目的基因一个小片段么？  质粒是pet-3C。双酶是ndeI 和Bham I，marker左边是2000，右边是10000的。500bp下面的是目的蛋白，现在是700bp下面也有片段被切出来。

酶切问题求助
1.jpg
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I am not a hero , but I served with heroes！
1楼 2016-01-12 11:16:36
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billie113
★
wlt728(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-01-12 11:33:35
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tzynew
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wlt728(金币+1): 谢谢参与
3楼2016-01-12 11:34:17
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xiaomaya2046
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4楼2016-01-12 11:45:34
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skyish
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一

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-01-12 11:47:21
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ycsqubit
★
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祝福

发自小木虫IOS客户端
6楼2016-01-12 11:49:17
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匿名
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7楼2016-01-12 11:53:01
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匿名
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8楼2016-01-12 11:53:58
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疯子J-F
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，，

发自小木虫Android客户端
9楼2016-01-12 11:56:08
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guanlianwu
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wlt728(金币+1): 谢谢参与
10楼2016-01-12 11:57:59
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