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胖蘑菇

银虫 (小有名气)

[交流] 做过染色后的细胞能不能再去做扫描电镜呢？

细胞昨天晚上染色做了荧光观察了，觉得长得不错，想做扫描，现在进行脱水处理去照SEM会有影响吗？
基材是金属片，成骨细胞培养。
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1楼 2016-01-07 15:23:36
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liubin

专家顾问 (著名写手)
能
2楼2016-01-07 15:33:41
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胖蘑菇

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liubin at 2016-01-07 15:33:41
能

细胞形态会瘪吗，课题组有人这样操作过，效果不好，是不是需要注意哪些问题？
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3楼2016-01-07 15:40:46
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liubin

专家顾问 (著名写手)
先固定，再脱水
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4楼2016-01-07 17:14:20
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liubin

专家顾问 (著名写手)
用戊二醛固定
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5楼2016-01-07 17:14:36
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胖蘑菇

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liubin at 2016-01-07 17:14:20
先固定，再脱水

染色之前就固定过了，完了想拍扫描的，染色是否影响扫描电镜结果呢
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6楼2016-01-07 17:43:45
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shiverinfang

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼: Originally posted by liubin at 2016-01-07 17:14:20
先固定，再脱水

请问下，支架里养有细胞之后，然后想去扫sem看细胞长得如何，我看到文献里有写脱水法（固定，再梯度乙醇脱水），请问效果好吗，会影响细胞形态吗。还有就是可不可以直接冰冻干燥呀？这不是更容易吗？谢谢啦

发自小木虫IOS客户端
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7楼2016-01-07 20:12:14
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
脱水脱醇 零界点干燥 然后拿去喷金和扫描
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8楼2016-01-08 09:18:48
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胖蘑菇

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shiverinfang at 2016-01-07 20:12:14
请问下，支架里养有细胞之后，然后想去扫sem看细胞长得如何，我看到文献里有写脱水法（固定，再梯度乙醇脱水），请问效果好吗，会影响细胞形态吗。还有就是可不可以直接冰冻干燥呀？这不是更容易吗？谢谢啦
...

梯度脱水后二氧化碳临界干燥即可。
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9楼2016-01-08 11:14:33
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胖蘑菇

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yifeng1206 at 2016-01-08 09:18:48
脱水脱醇 零界点干燥 然后拿去喷金和扫描

这个我晓得的，我想问的是染色后的样品还能继续看扫描电镜么
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10楼2016-01-08 11:15:14
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