24小时热门版块排行榜    

查看: 1073  |  回复: 1

clx@6016

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE显示是四聚体,凝胶层析结果表明是二聚体 已有1人参与

近期做一个蛋白,发现非常奇特的现象,请各位懂行的大神给些意见,不胜感激。
这个蛋白的理论分子量大小是37kDa,可是在SDS-PAGE上居然显示为140-150kDa之间,我们推测这是同源四聚体,而且具体的组成形式是非二硫键模式的。
于是我们利用Superdex200进行凝胶阻滞实验,根据标准曲线(柱子自带的标准曲线,我们自己跑了maker也重新做了标准曲线),结果显示其分子量大小在
80kD左右,也就是说是二聚体。
这是一个矛盾的现象,请问大家有什么可以解释的方法或者参考文献吗?
1.80kDa的二聚体蛋白有什么情况,可以让他SDS-PAGE显示比自身分子量大?
2.140kDa的蛋白在什么特殊的情况下,他的凝胶阻滞实验会延后?或者说凝胶阻滞除了分子量还和别的有关吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得是二聚体的可能比较大。一般SDS-PAGE条件下,多聚体都会解离。能不能详细说下你的蛋白有没有做过什么预处理导致交联了?或者结合了核酸?或者自身所带电性很极端?方便的话放上SDS-PAGE图看看。
2楼2016-01-07 14:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 clx@6016 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +4 小小陈小小 2026-03-22 7/350 2026-03-25 19:07 by 星空星月
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 287求调剂 +10 晨昏线与星海 2026-03-19 11/550 2026-03-25 10:35 by userper
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-20 4/200 2026-03-25 10:16 by allen-yin
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
信息提示
请填处理意见