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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS-PAGE显示是四聚体，凝胶层析结果表明是二聚体
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clx@6016

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE显示是四聚体，凝胶层析结果表明是二聚体 已有1人参与

近期做一个蛋白，发现非常奇特的现象，请各位懂行的大神给些意见，不胜感激。
这个蛋白的理论分子量大小是37kDa，可是在SDS-PAGE上居然显示为140-150kDa之间，我们推测这是同源四聚体，而且具体的组成形式是非二硫键模式的。
于是我们利用Superdex200进行凝胶阻滞实验，根据标准曲线（柱子自带的标准曲线，我们自己跑了maker也重新做了标准曲线），结果显示其分子量大小在
80kD左右，也就是说是二聚体。
这是一个矛盾的现象，请问大家有什么可以解释的方法或者参考文献吗？
1.80kDa的二聚体蛋白有什么情况，可以让他SDS-PAGE显示比自身分子量大？
2.140kDa的蛋白在什么特殊的情况下，他的凝胶阻滞实验会延后？或者说凝胶阻滞除了分子量还和别的有关吗？
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1楼 2016-01-07 14:19:32
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uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人觉得是二聚体的可能比较大。一般SDS-PAGE条件下，多聚体都会解离。能不能详细说下你的蛋白有没有做过什么预处理导致交联了？或者结合了核酸?或者自身所带电性很极端？方便的话放上SDS-PAGE图看看。
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2楼2016-01-07 14:42:32
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