24小时热门版块排行榜    

查看: 652  |  回复: 5

nadia926499

木虫 (小有名气)

[求助] 手上有一个人源的蛋白需要纯化,但是很不稳定,全长的用多种方法... 已有1人参与

手上有一个人源的蛋白需要纯化,但是很不稳定,全长的用多种方法纯化都会降解,造成没有活性。截短以后也会没有活性。用大肠杆菌表达可溶性也不是很好。所以比较苦恼,有没有什么好的办法去解决这种问题? @hc-material

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小慧_amy

新虫 (初入文坛)

可以转到酵母表达 或者昆虫细胞。截短也要多试几个位置,或者突变蛋白中的半胱氨酸,尽量少形成二硫键

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-01-05 00:39:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nadia926499

木虫 (小有名气)

如果突变了蛋白中的半胱氨酸,会不会对本来的正确折叠造成影响,形成不一样的空间结构?

发自小木虫Android客户端
3楼2016-01-05 08:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MarchZR

银虫 (小有名气)

用真核表达试试看,有些蛋白需要复杂修饰才能有活性,原核表达是可以保证可溶性蛋白的,包涵体也是可以成为可溶性蛋白,是不是上清就难说了,真核表达的话,酵母,哺乳动物细胞表达都可以
4楼2016-01-05 14:01:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nadia926499

木虫 (小有名气)

用过细胞表达了,带了标签表达出来都不挂柱,估计直接断掉了

发自小木虫Android客户端
5楼2016-01-05 16:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

去Uniprot上查找人家有提交的同源蛋白,应该会有做修饰或者截短的人,看看人家怎么做的
6楼2016-01-08 16:19:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nadia926499 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +7 junqihahaha 2026-03-26 7/350 2026-03-26 16:51 by allen-yin
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 329求调剂 +3 钮恩雪 2026-03-25 3/150 2026-03-25 14:43 by 糖加冰
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见