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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 酵母双杂交
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南雪苏

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂交

我做酵母双杂交，在制备酵母感受态细胞AH109老是做不出来？求解啊附：液体培养基是YPDA
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1楼 2016-01-04 16:14:36
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南雪苏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xpb2005 at 2016-01-04 17:07:31
你的YPDA配方是？
取1毫升菌液离心，沉淀用水洗一次，离心，正常菌体沉淀是白色的，还有就是你在转接后，菌液生长的速度正常吗？...

我的配方是：100ml  蛋白胨2g, 酵母提取物1g，灭菌15min，然后加5ml40%葡萄糖，0.75ml0.2%ADE，用灭菌的玻璃小平摇的，30度220rpm/min
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7楼2016-01-04 17:23:59
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xpb2005

银虫 (小有名气)
你说的太简单了，详细的说说你做的过程，以及最后涂板后的生长结果？
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2楼2016-01-04 16:44:18
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南雪苏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xpb2005 at 2016-01-04 16:44:18
你说的太简单了，详细的说说你做的过程，以及最后涂板后的生长结果？

我是这样做的，首先在平板上挑取单克隆菌落在5毫升的YPDA中培养8-11小时，但是在接下来的步骤中，发现培养的菌落有臭味，根本没有酒香味，我怀疑是培养基的问题，但是又不知道是哪出了问题？
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3楼2016-01-04 16:56:26
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 南雪苏 at 2016-01-04 16:56:26
我是这样做的，首先在平板上挑取单克隆菌落在5毫升的YPDA中培养8-11小时，但是在接下来的步骤中，发现培养的菌落有臭味，根本没有酒香味，我怀疑是培养基的问题，但是又不知道是哪出了问题？...

那这样的话，你是做到这步发现气味不对就没往下做，是吗？
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4楼2016-01-04 16:58:22
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