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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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南雪苏

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂交

我做酵母双杂交,在制备酵母感受态细胞AH109老是做不出来?求解啊附:液体培养基是YPDA
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake

你是哪个学校的啊,我是云南的!要方便的话想和你要点AH109.我没有,只有Y190.

发自小木虫IOS客户端
10楼2016-03-18 08:00:52
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xpb2005

银虫 (小有名气)

你说的太简单了,详细的说说你做的过程,以及最后涂板后的生长结果?
2楼2016-01-04 16:44:18
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南雪苏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xpb2005 at 2016-01-04 16:44:18
你说的太简单了,详细的说说你做的过程,以及最后涂板后的生长结果?

我是这样做的,首先在平板上挑取单克隆菌落在5毫升的YPDA中培养8-11小时,但是在接下来的步骤中,发现培养的菌落有臭味,根本没有酒香味,我怀疑是培养基的问题,但是又不知道是哪出了问题?
3楼2016-01-04 16:56:26
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xpb2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 南雪苏 at 2016-01-04 16:56:26
我是这样做的,首先在平板上挑取单克隆菌落在5毫升的YPDA中培养8-11小时,但是在接下来的步骤中,发现培养的菌落有臭味,根本没有酒香味,我怀疑是培养基的问题,但是又不知道是哪出了问题?...

那这样的话,你是做到这步发现气味不对就没往下做,是吗?
4楼2016-01-04 16:58:22
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南雪苏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xpb2005 at 2016-01-04 16:58:22
那这样的话,你是做到这步发现气味不对就没往下做,是吗?...

是的
5楼2016-01-04 16:58:44
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xpb2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 南雪苏 at 2016-01-04 16:58:44
是的...

你的YPDA配方是?
取1毫升菌液离心,沉淀用水洗一次,离心,正常菌体沉淀是白色的,还有就是你在转接后,菌液生长的速度正常吗?
6楼2016-01-04 17:07:31
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南雪苏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xpb2005 at 2016-01-04 17:07:31
你的YPDA配方是?
取1毫升菌液离心,沉淀用水洗一次,离心,正常菌体沉淀是白色的,还有就是你在转接后,菌液生长的速度正常吗?...

我的配方是:100ml  蛋白胨2g, 酵母提取物1g,灭菌15min,然后加5ml40%葡萄糖,0.75ml0.2%ADE,用灭菌的玻璃小平摇的,30度220rpm/min
7楼2016-01-04 17:23:59
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南雪苏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xpb2005 at 2016-01-04 17:07:31
你的YPDA配方是?
取1毫升菌液离心,沉淀用水洗一次,离心,正常菌体沉淀是白色的,还有就是你在转接后,菌液生长的速度正常吗?...

沉淀用水洗后是白色的,转接后菌液生长速度不正常,10小时左右基本没变化,之后几小时就浑浊了。之前也涂过一次板,2天后没长菌落,第二天后就长了十几个白色菌落,有臭味并且不饱满,隔几天后菌落水分蒸发就干了
8楼2016-01-04 17:28:15
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南雪苏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 南雪苏 at 2016-01-04 17:28:15
沉淀用水洗后是白色的,转接后菌液生长速度不正常,10小时左右基本没变化,之后几小时就浑浊了。之前也涂过一次板,2天后没长菌落,第二天后就长了十几个白色菌落,有臭味并且不饱满,隔几天后菌落水分蒸发就干了...

你也是做酵母的吗?可以借鉴一下你的实验方法不?万分感谢
9楼2016-01-04 17:30:23
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