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wuruiwei2014

新虫 (初入文坛)

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虫号: 3650058
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专业: 临床分子生物学检验

[求助] 古菌V3-V4区PCR相关问题

我用参考文献上古菌V3-V4区引物：0357F/0691R，PCR反应体系（50μl）：上下游引物各2.5μl， dNTPs5μl， 10×Easy Taq buffer5μl， Easy Taq DNA聚合酶1μl， DNA1μl，补ddH2O至50μl，扩增程序：95 ℃预变性5 min；30个循环：95℃变性30s，52 ℃退火45 s，72 ℃延伸1 min；72 ℃终延伸10 min。结果无条带，重复好几次了，之前也用此条件P过，虽特异性不好，但有目的条带，重新换样品之后就P不出来了，本人知识有限，能想到的问题也有限，希望各位友友指点迷津，谢谢啦@biostar2009

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1楼 2016-01-04 09:59:59

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