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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 液相分离小肽求助
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窈窕淑女0421

铁虫 (初入文坛)

[求助] 液相分离小肽求助 已有5人参与

采用安捷伦1260分析型液相分离小肽，得到下面的图谱，根据出峰时间收集这个三个峰，冷冻干燥后再次溶解再跑液相却没有峰出来，这是为什么，是含量太低没测出来吗？急求帮助!

液相分离小肽求助
160.jpg
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丢了幸福的猪
1楼 2016-01-02 21:12:49
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qlchp

银虫 (小有名气)
你确定你收集到所需要的成分了？干燥的时候，目标物挥发比例多少？

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2楼2016-01-02 21:28:54
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窈窕淑女0421

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qlchp at 2016-01-02 21:28:54
你确定你收集到所需要的成分了？干燥的时候，目标物挥发比例多少？

按出峰时间接收，我也不确定有没有收集到，，水溶性样品，挥发比例也不清楚。。。
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丢了幸福的猪
3楼2016-01-02 21:37:52
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
窈窕淑女0421(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-01-17 20:38:59
看吸收值，你这样品浓度很低，进样时候可以加大进样浓度，另外注意出峰时间与接收，是有一点点延迟的，具体要看管道长度。可以咨询一下安捷伦客服，多少长度合适。
然后就是要多积累，重复进样几天时间，再冷冻，溶解。冷冻以后要能看到样品。

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4楼2016-01-02 22:06:54
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窈窕淑女0421

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zinfly at 2016-01-02 22:06:54
看吸收值，你这样品浓度很低，进样时候可以加大进样浓度，另外注意出峰时间与接收，是有一点点延迟的，具体要看管道长度。可以咨询一下安捷伦客服，多少长度合适。
然后就是要多积累，重复进样几天时间，再冷冻，溶 ...

进样量20uL，重复进样多次，收集冷冻干燥，再次加少量水溶解，跑液相没有出峰。
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丢了幸福的猪
5楼2016-01-05 15:37:15
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zinfly

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 窈窕淑女0421 at 2016-01-05 15:37:15
进样量20uL，重复进样多次，收集冷冻干燥，再次加少量水溶解，跑液相没有出峰。...

样品浓度多少？
冷冻干燥后溶解性会变化，需要超声或者涡旋处理样品。尽可能少点水。
另外你20uL，这是检测级别的，不是制备级。制备级别一般50-100uL，柱子也要换直径大一点的。流速也要相应提高。
从你图上看，你的浓度和进样量都可以提高。
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6楼2016-01-05 16:13:03
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春暖花开WH

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
sytucom: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励新虫参与 2016-01-17 20:39:09
窈窕淑女0421(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-01-17 20:39:16
看纵坐标，信号响应比较小呢。加大进样量，或浓缩一下看看
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7楼2016-01-06 11:13:56
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窈窕淑女0421

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zinfly at 2016-01-05 16:13:03
样品浓度多少？
冷冻干燥后溶解性会变化，需要超声或者涡旋处理样品。尽可能少点水。
另外你20uL，这是检测级别的，不是制备级。制备级别一般50-100uL，柱子也要换直径大一点的。流速也要相应提高。
从你图上看 ...

我就是用的分析型液相半制备收集，进样量最多50ul，流速1ml/min。提高进样量后柱压好高，达到近300bar
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丢了幸福的猪
8楼2016-01-06 11:31:31
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窈窕淑女0421

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 春暖花开WH at 2016-01-06 11:13:56
看纵坐标，信号响应比较小呢。加大进样量，或浓缩一下看看

浓缩试过旋蒸，因为是水溶性的多肽类样品，很容易气泡，温度也不能太高
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丢了幸福的猪
9楼2016-01-06 11:33:13
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fry000

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sytucom: 金币+2, 鼓励新虫参与 2016-01-17 20:39:38
窈窕淑女0421(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-01-17 20:39:50
建议先高倍浓缩，再把流速降低一些，让小肽出峰尽量分开
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enjoyourlife
10楼2016-01-06 13:13:59
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