24小时热门版块排行榜    

查看: 1641  |  回复: 1

美琪琪

新虫 (初入文坛)

[求助] 定量PCR标准曲线所算的浓度与稀释浓度不一样怎么回事啊?跪求大神们帮我解决下?

稀释浓度         CQ值       X值((b-y)/k)  拷贝数
6.7x107        10000000  13.45           6.005880623            1013632.725
6.7x106        1000000          16.91           4.988532784            97394.13045
6.7x105        100000          20.38           3.968244634            9294.898121
6.7x104        10000          23.45           3.06556895           1162.971174
6.7x103        1000          27.49           1.877683034           75.4541332
6.7x102        100              30.22     1.074977948          11.8844188
6.7x101        10              33.4     0.139958836           1.380253432
以上数据;10倍稀释了标准质粒的浓度的,   CQ值是做标曲时的值,  x是根据y=-3.401x+33.876 带入CQ值得到的 ,然后就是算出拷贝数浓度,
但是问题出来了,假如我把CQ值等于27.49(以上CQ值),但是根据标准曲线算出的浓度等于75.5个拷贝数,但是在稀释浓度是10的3次方啊,同理,在CQ值等于33.4时,所算出的拷贝数是1.3个拷贝数,但是我的标曲上是最低拷贝数是67个拷贝数啊,显然不对了,怎么回事啊?   急死了,6月份毕业,在等文章了。跪谢大神帮忙解答了!!!
                    在线等待!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)

手机上看表效果不是很好,所以就不说数据本身了。
请考虑稀释倍数的范围,引物括增效率高低影响会很大,通常在一个比较小的范围内才可接受。建议稀释倍数控制一下,比如2倍或4倍梯度稀释,大约5-7个点吧,应该还能接受。

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
2楼2016-01-01 23:20:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 美琪琪 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +12 等待解的谜 2026-08-06 16/800 2026-08-07 09:01 by wlwhappy
[基金申请] 基金中了 +9 laoda193707 2026-08-06 9/450 2026-08-07 08:54 by ZJTJZ
[基金申请] 听说今天filecode变了 +20 布布和一二 2026-08-06 39/1950 2026-08-07 08:50 by wlwhappy
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +4 archvillain 2026-08-06 8/400 2026-08-07 08:06 by 带你看大海
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见