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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒抽提，为什么出现很亮的低分子带
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364123299

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒抽提，为什么出现很亮的低分子带 已有8人参与

用碱裂解法抽提质粒，发现了一条低分子量很亮的带，导致测得质粒浓度很高，260/280正常，困扰了很久，请问是蛋白污染么,该如何解决这个问题

质粒抽提，为什么出现很亮的低分子带
WP_20151231_004.jpg
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1楼 2016-01-01 00:54:34
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

364123299

金虫 (小有名气)
最低的maker条带为1k
最后核酸用含Rnase的水溶解的
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2楼2016-01-01 01:11:10
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普通回帖

wfshan1658

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是RNA，可以在苯酚抽提之前的一步加RNase处理掉

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3楼2016-01-01 07:07:10
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wfshan1658

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

RNA一般不影响后续的实验，不过可以间接反映抽提的质量！

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4楼2016-01-01 07:15:00
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曹阿娇
。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-01-01 07:17:55
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lixiang1099
祝福！

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6楼2016-01-01 07:44:03
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364123299

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wfshan1658 at 2016-01-01 07:07:10
是RNA，可以在苯酚抽提之前的一步加RNase处理掉

但是我用了RNA酶 20ug/ml  37度处理过夜了，为什么还会有RNA呢
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7楼2016-01-01 10:26:58
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364123299

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wfshan1658 at 2016-01-01 07:07:10
是RNA，可以在苯酚抽提之前的一步加RNase处理掉

我是最后用水溶解的时候加的RNase
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8楼2016-01-01 10:27:56
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xufengnbu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先看看你使用的试剂盒中试剂是否有因为环境温度低而析出晶体，如有就加热下再使用。其次在第一部solution l中加入rnaseA，washing solution要高转速空离心，最后溶解用灭菌超纯水。

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why is the way to success
9楼2016-01-02 17:19:14
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364123299

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xufengnbu at 2016-01-02 17:19:14
首先看看你使用的试剂盒中试剂是否有因为环境温度低而析出晶体，如有就加热下再使用。其次在第一部solution l中加入rnaseA，washing solution要高转速空离心，最后溶解用灭菌超纯水。
...

我是抽提的
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10楼2016-01-02 17:25:41
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