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364123299

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒抽提,为什么出现很亮的低分子带 已有8人参与

用碱裂解法抽提质粒,发现了一条低分子量很亮的带,导致测得质粒浓度很高,260/280正常,困扰了很久,请问是蛋白污染么,该如何解决这个问题

质粒抽提,为什么出现很亮的低分子带
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364123299

金虫 (小有名气)

最低的maker条带为1k
最后核酸用含Rnase的水溶解的
2楼2016-01-01 01:11:10
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普通回帖

wfshan1658

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是RNA,可以在苯酚抽提之前的一步加RNase处理掉

发自小木虫Android客户端
3楼2016-01-01 07:07:10
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wfshan1658

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

RNA一般不影响后续的实验,不过可以间接反映抽提的质量!

发自小木虫Android客户端
4楼2016-01-01 07:15:00
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5楼2016-01-01 07:17:55
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6楼2016-01-01 07:44:03
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364123299

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wfshan1658 at 2016-01-01 07:07:10
是RNA,可以在苯酚抽提之前的一步加RNase处理掉

但是我用了RNA酶 20ug/ml  37度处理过夜了,为什么还会有RNA呢
7楼2016-01-01 10:26:58
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364123299

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wfshan1658 at 2016-01-01 07:07:10
是RNA,可以在苯酚抽提之前的一步加RNase处理掉

我是最后用水溶解的时候加的RNase
8楼2016-01-01 10:27:56
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xufengnbu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先看看你使用的试剂盒中试剂是否有因为环境温度低而析出晶体,如有就加热下再使用。其次在第一部solution l中加入rnaseA,washing solution要高转速空离心,最后溶解用灭菌超纯水。

发自小木虫IOS客户端
why is the way to success
9楼2016-01-02 17:19:14
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364123299

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by xufengnbu at 2016-01-02 17:19:14
首先看看你使用的试剂盒中试剂是否有因为环境温度低而析出晶体,如有就加热下再使用。其次在第一部solution l中加入rnaseA,washing solution要高转速空离心,最后溶解用灭菌超纯水。
...

我是抽提的
10楼2016-01-02 17:25:41
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