应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取
81/1返回列表
查看: 946  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

龙龙蛋蛋狗

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取 已有5人参与

做基因打靶方面的，载体转到大肠杆菌后，由于表达载体拷贝数过低，在提取质粒时提取出来的量也很少，无法做切胶回收片断。
怎么才能提高质粒浓度？我用用的是天根试剂盒，求高人指点
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-12-31 19:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssswzf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
龙龙蛋蛋狗(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:27:40
你好，你用的什么方法提取啊？手工提取还是柱子提取？
最后的洗脱是比较矛盾的，如果要求浓度的话，洗脱液就少，但是效率不高。如果追求总量的话，质粒就稀释了。
与其这样纠结，不如换种方法试试看！
赞一下 回复此楼
2楼2016-01-05 16:42:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

carl_taijun

铜虫 (初入文坛)
菌液大量培养～～在实验中间步骤等择机和并到一起～

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-01-07 01:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

菌液用大管培养，培养时间稍微长一点。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2016-01-07 08:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是淡淡老师

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

手抽的方法会比试剂盒抽的浓度高出十几倍，但手抽的不太干净，杂质会比较多。

要增加浓度的话建议如下：两次上柱，60度水两次洗脱等。

培养时间就在14小时左右，直到培养基浑浊不透明为止。
赞一下 回复此楼
5楼2016-01-07 19:07:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我的方法这这样的，50lm菌液，离心后用4-6个体系（小提试剂盒）进行悬浮，裂解，中和，离心等步骤；然后将上清加到两个吸附柱上（可多次上柱）；漂洗正常，最后每个吸附柱用40ul左右的65度水洗脱。
赞一下 回复此楼
生物科学
6楼2016-01-07 20:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

边木殇

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们一般是用的试剂盒提取，大量提可以用maxi prep。 摇菌14-16小时
赞一下 回复此楼
7楼2016-01-07 20:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好好学习啊咧

新虫 (初入文坛)
菌液多点 全加到一个吸附柱上试试

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-16 18:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 龙龙蛋蛋狗 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-13 11:37 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:13 by Equinoxhua
[考博] 博士申请 +4 z_l_l_666 2026-11-06 4/200 2026-11-13 06:19 by wlf1982
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 13:02 by ECLTXnJnRSXf
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:20 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:41 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 9/450 2026-11-12 09:24 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 4/200 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭