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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by western虫 at 2015-12-29 11:59:17
曾经遇到过类似的现象，长的好好的传代几次就全飘起来死掉了。后来发现是血清的问题，换了血清就好了。你可以继续尝试换品质好一些的血清

感谢您的建议，不过我现在用的已经是GIBCO家的胎牛血清啦！还在逐一排查中，今天换了培养瓶和新配的培养液，以观后效！

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11楼2015-12-29 17:21:16
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biocherry

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by western虫 at 2015-12-29 11:59:17
曾经遇到过类似的现象，长的好好的传代几次就全飘起来死掉了。后来发现是血清的问题，换了血清就好了。你可以继续尝试换品质好一些的血清

你用的国外的血清吗

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12楼2015-12-29 22:38:20
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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by zcc爱化学 at 2015-12-28 22:33:17
你是24小时才去除DMSO吗？我们都是要么复苏时去除，要么不超过12小时换第一次液

复苏时离心除DMSO的

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13楼2015-12-29 22:45:35
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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ivyvampire at 2015-12-28 21:42:15
测测支原体看看吧

感谢您的回复，还在排查

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14楼2015-12-29 22:47:02
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该不是换液的问题，我直接复苏的细胞72h不换液已经良好
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欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
15楼2015-12-30 07:24:04
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沈子甄

新虫 (初入文坛)
复苏时离心去冻存液，加培养基轻轻吹散细胞，再离心，如此两次，目的在于除净DMSO，24小时左右观察培养基颜色变化，决定要不要换液。建议用质量好的血清，和测下培养基的PH
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16楼2015-12-30 14:04:10
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芳荷恋雨

铜虫 (小有名气)
感觉比较像营养不良。复苏后贴壁好，说明不是冻存液的问题，也不是复苏过程的问题。两种情况，一种是培养液，一种是血清。可以查一下该细胞冻存前是用什么培养基养的，哪一种血清，以及血清的浓度。血清对细胞的影响一般会比较大，可以适当增加血清浓度，或者更换血清。仅供参考
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自己选的路，爬也要爬完
17楼2015-12-31 08:53:19
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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 芳荷恋雨 at 2015-12-31 08:53:19
感觉比较像营养不良。复苏后贴壁好，说明不是冻存液的问题，也不是复苏过程的问题。两种情况，一种是培养液，一种是血清。可以查一下该细胞冻存前是用什么培养基养的，哪一种血清，以及血清的浓度。血清对细胞的影响 ...

感谢您的回复，我也考虑过，现在用的是与冻存前同样的血清和培养液啦！

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18楼2015-12-31 20:29:06
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ys珊

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我之前遇到过这种情况的，一开始是飘起来，后面直接就死掉了，你的图2基本就死光了，没用了，我已开始觉得是DMSO没除干净，重新复苏也是不行的，换血清什么的都不行，最后把整个培养箱重新灭菌，之后就好了。就是污染了。
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19楼2016-01-07 11:32:47
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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by ys珊 at 2016-01-07 11:32:47
我之前遇到过这种情况的，一开始是飘起来，后面直接就死掉了，你的图2基本就死光了，没用了，我已开始觉得是DMSO没除干净，重新复苏也是不行的，换血清什么的都不行，最后把整个培养箱重新灭菌，之后就好了。就是污 ...

嗯嗯，谢谢回复！还在继续中！今天细胞状态还不错

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20楼2016-01-07 17:36:18
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