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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)

[求助] 救救我的细胞吧! 已有5人参与

我的细胞之前养一直挺好,突然有一天就不长了,大批死亡,具体情况是:细胞复苏后第二天贴壁挺好见图1,72小时再看就都死了见图2,特别焦急,请前辈们帮我看看问题出在哪里?我用的培养液是DMEM,10%胎牛血清,双抗,培养液一直很干净,没见里面有杂质或其它的东西

救救我的细胞吧!


救救我的细胞吧!-1


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沈子甄

新虫 (初入文坛)

复苏时离心去冻存液,加培养基轻轻吹散细胞,再离心,如此两次,目的在于除净DMSO,24小时左右观察培养基颜色变化,决定要不要换液。建议用质量好的血清,和测下培养基的PH
16楼2015-12-30 14:04:10
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yangkui123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
复苏后,培养72小时期间有没换液?看你72小时的照片貌似细胞都凋亡或者死了很多了…考虑一下是不是血清的问题,或者培养基在不经意间混了其他杂质…还有就是考虑一下冻存夜的问题,这个可能性小点…

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2楼2015-12-28 20:55:24
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yangkui123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

培养基的杂质可能是溶解在里面了…建议重新配置一下…这种情况,只能一点一点排查…

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3楼2015-12-28 20:57:19
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Fanhua_yang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangkui123 at 2015-12-28 20:55:24
复苏后,培养72小时期间有没换液?看你72小时的照片貌似细胞都凋亡或者死了很多了…考虑一下是不是血清的问题,或者培养基在不经意间混了其他杂质…还有就是考虑一下冻存夜的问题,这个可能性小点…
...

谢谢楼上前辈的解答,我在24小时时换液了,换液是对是错呢!
还有我也怀疑过血清,换了一批做,结果还是这样,已经做了3次了,您说有可能是支原体污染吗?

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4楼2015-12-28 21:00:54
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