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救救我的细胞吧!
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Fanhua_yang
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救救我的细胞吧!
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我的细胞之前养一直挺好,突然有一天就不长了,大批死亡,具体情况是:细胞复苏后第二天贴壁挺好见图1,72小时再看就都死了见图2,特别焦急,请前辈们帮我看看问题出在哪里?我用的培养液是DMEM,10%胎牛血清,双抗,培养液一直很干净,没见里面有杂质或其它的东西
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1楼
2015-12-28 20:22:24
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MM
专业: 生物无机化学
你是24小时才去除DMSO吗?我们都是要么复苏时去除,要么不超过12小时换第一次液
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9楼
2015-12-28 22:33:17
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yangkui123
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专业: 化学生物学与生物有机化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
复苏后,培养72小时期间有没换液?看你72小时的照片貌似细胞都凋亡或者死了很多了…考虑一下是不是血清的问题,或者培养基在不经意间混了其他杂质…还有就是考虑一下冻存夜的问题,这个可能性小点…
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2楼
2015-12-28 20:55:24
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yangkui123
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虫号: 1933412
注册: 2012-08-10
专业: 化学生物学与生物有机化学
【答案】应助回帖
培养基的杂质可能是溶解在里面了…建议重新配置一下…这种情况,只能一点一点排查…
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3楼
2015-12-28 20:57:19
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Fanhua_yang
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专业: 中药心脑血管药理
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2楼
:
Originally posted by
yangkui123
at 2015-12-28 20:55:24
复苏后,培养72小时期间有没换液?看你72小时的照片貌似细胞都凋亡或者死了很多了…考虑一下是不是血清的问题,或者培养基在不经意间混了其他杂质…还有就是考虑一下冻存夜的问题,这个可能性小点…
...
谢谢楼上前辈的解答,我在24小时时换液了,换液是对是错呢!
还有我也怀疑过血清,换了一批做,结果还是这样,已经做了3次了,您说有可能是支原体污染吗?
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4楼
2015-12-28 21:00:54
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