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virgemzhq铁虫 (初入文坛)
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[求助]
有关荧光探针和引物的一些疑问
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刚开始接触dPCR，在看原理的时候有一点点小的困惑，还请大神予以解答，非常感谢！！！ PCR的基本过程就是将DNA分解成单链后，利用引物与模板配对进行DNA复制，利用荧光检测扩增程度的过程。 但是在看到MB荧光探针的原理时，又产生了疑问。 “分子信标的茎环结构中,环一般为15-30 个核苷酸长,并与目标序列互补；茎一般5-7 个核苷酸长,并相互配对形成茎的结构。荧光基团标记在探针的一端,而淬灭剂则标记在另一端。在复性温度下,因为模板不存在时形成茎环结构,当加热变性会互补配对的茎环双链解开,如果有模板存在环序列将与模板配对。” 我想问的是：此时MB荧光探针如果与模板配对，发出荧光，那么引物怎么和模板配对？？？ 本人菜鸟，还请大神能详细的说明，在此谢过。 |
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