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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 纯化蛋白质过滤膜的选择
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罗刚

木虫 (小有名气)

[求助] 纯化蛋白质过滤膜的选择 已有2人参与

我在为一种药物做剂型研究，在做溶剂的选择，客户要求溶剂溶解了API后溶液要澄清，API是小蛋白质类，我拿5% mannitol作为溶剂溶解了API，起初时候溶液是澄清的，可是过了半个小时后溶液开始变浑浊，这是什么原因？
之后我用过两种膜过滤，PTFE和PVDF，PTFE过滤后依旧浑浊，但是PVDF过滤后保持澄清，由于我不负责做assay的，不能确定过滤后API的量，PVDF过滤后是否API同时会被过滤掉？还有为啥PTFE膜过滤了依旧是浑浊？膜的孔径都是0.2的。
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一天进步一点
1楼 2015-12-26 06:14:13
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北国佳人

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PTFE--惰性，，跟蛋白反应的几率少，PVDF膜会与蛋白结合，损失一些蛋白，  选用进口的透析膜管过滤下看看怎样，，
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努力的小蜜蜂
4楼2015-12-26 16:26:54
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哥本哈根达斯

木虫 (知名作家)

木虫之王
分析一下除了材质区别外，还有操作方面有什么不同？

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有情饮水饱！
2楼2015-12-26 06:26:32
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哥本哈根达斯

木虫 (知名作家)

木虫之王

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PVDF膜在使用时需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。也就是说PVDF膜已经和你的目标蛋白结合了，所以比较清，你想办法测一下滤液中产物的含量啊！

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有情饮水饱！
3楼2015-12-26 06:35:59
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milamiya

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2016-01-03 08:33:10
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