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qinhuanhuan

新虫 (小有名气)

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[求助] 请教做过ELISA测试的大神，为什么我测得OD值都在3.3到3.5之间呢，是不是太高了已有1人参与

最近第一次做ELISA测试，测VEGF的蛋白含量的，按照试剂盒的操作步骤做了两次，每次测的的OD值都差不多，都是所有孔的OD值大致在3.3到3.5范围内，问题如下：
1.为什么所有孔的OD值都这么高呢，正常吗？
2.为什么我做的空白孔的OD值都要比标准品最大浓度的OD值还要大呢。
我买的试剂盒以前就买好了，只有六个月的保质期，做测试时刚过保质期问了厂家说是可以正常用的，以上问题出现的原因会不会是试剂盒过期的原因呢？
另外，ELISA测试时有什么特别需要注意的地方吗？听说拍板很重要。
马上就要毕业了，但是ELISA测试总是做不出来，希望大家可以帮帮忙哇，非常感谢。
我测得的OD值图片如下第一行1-10是标准品的OD值

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