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足下客

木虫 (正式写手)
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20楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2015-12-24 12:07:03
你是内参基因的引物和目的基因的引物加在同一管中吗
...

是加在一起的。一般我们先不加内参做一轮，然后再加入内参的引物和模板做一轮，这样可以看一下内参基因对目的基因扩增的影响。如果影响很大的话，这个内参就得调了，内参浓度要尽可能低一些
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21楼2015-12-24 12:44:32
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 足下客 at 2015-12-24 12:44:32
是加在一起的。一般我们先不加内参做一轮，然后再加入内参的引物和模板做一轮，这样可以看一下内参基因对目的基因扩增的影响。如果影响很大的话，这个内参就得调了，内参浓度要尽可能低一些...

你加在一起用的是探针法吗？还有就是你用染料法做的时候你用的体系是什么，方便告知一下吗？我买的宝生物的试剂盒，说明书上的仪器没有我现在用的仪器名称，他推荐的体系也没法参考。期待你的回复。
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22楼2015-12-24 20:35:22
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足下客

木虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2015-12-24 20:35:22
你加在一起用的是探针法吗？还有就是你用染料法做的时候你用的体系是什么，方便告知一下吗？我买的宝生物的试剂盒，说明书上的仪器没有我现在用的仪器名称，他推荐的体系也没法参考。期待你的回复。...

我是用的taqman探针。染料法我们是用的ABI的，是以前读研的时候用过的，早就不记得了啊。你可以打宝生物的技术支持详细咨询一下，像你这种情况用他们的试剂盒该怎么用。
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23楼2015-12-25 08:37:54
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by 足下客 at 2015-12-25 08:37:54
我是用的taqman探针。染料法我们是用的ABI的，是以前读研的时候用过的，早就不记得了啊。你可以打宝生物的技术支持详细咨询一下，像你这种情况用他们的试剂盒该怎么用。...

好的谢谢
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24楼2015-12-25 08:52:15
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zhenxing1991

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2015-12-22 19:27:00
第一条曲线的CT值是内参的。关于扩增荧光峰值，你做的是多少，内参的CT值怎么处理。求帮助...

你把模板浓度调高试试，楼上说的是绝对定量，你用的sybr做的是相对定量，思路有些不同。
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25楼2015-12-28 19:52:13
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by zhenxing1991 at 2015-12-28 19:52:13
你把模板浓度调高试试，楼上说的是绝对定量，你用的sybr做的是相对定量，思路有些不同。...

模板浓度提高是增加CDNA的量吗？你一般加多少

发自小木虫Android客户端
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26楼2015-12-29 10:51:27
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