24小时热门版块排行榜    

查看: 1385  |  回复: 25
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

取个什么名啊

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量PCR实验数据求助 已有1人参与

我分别用目的基因与内参基因及阴性对照做了荧光定量的预实验,结果如下图,用了两对引物,第三附图中前一个峰是目的基因,后一个峰是内参基因的,这样的实验结果能用吗?

荧光定量PCR实验数据求助
IMG_20151222_131208.jpg


荧光定量PCR实验数据求助-1
IMG_20151222_131652.jpg


荧光定量PCR实验数据求助-2
IMG_20151222_132252.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
取个什么名啊: 金币+100, ★★★★★最佳答案 2015-12-24 08:37:30
再就是你的内参基因是不是和目的基因在一个模板上?内参基因一般都是用人工构建的质粒,这样方便调节浓度。如果和目的基因在一个模板上,内参基因没法调整浓度。一般内参质粒原液要用TE至少稀释10000倍以上
14楼2015-12-23 15:41:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你第一幅图的扩增曲线,第一条曲线的Ct值那么靠前,显然是不对的。而且你的内参基因的扩增荧光增峰值怎么会那么低,整个扩增就有问题

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-12-22 15:54:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

取个什么名啊

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 足下客 at 2015-12-22 15:54:41
看你第一幅图的扩增曲线,第一条曲线的Ct值那么靠前,显然是不对的。而且你的内参基因的扩增荧光增峰值怎么会那么低,整个扩增就有问题

第一条曲线的CT值是内参的。关于扩增荧光峰值,你做的是多少,内参的CT值怎么处理。求帮助
3楼2015-12-22 19:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2015-12-22 19:27:00
第一条曲线的CT值是内参的。关于扩增荧光峰值,你做的是多少,内参的CT值怎么处理。求帮助...

Ct值我们一般都是在18以后,内参的浓度你自己要控制好,如果浓度很高,你要先用TE稀释。荧光增峰我们一般至少在1000-2000,大部分情况都在2500左右。不知道你扩的是DNA还是RNA,你的反应体系可能有问题
4楼2015-12-23 09:10:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
信息提示
请填处理意见