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免疫沉淀的重轻链干扰如何排除 已有2人参与
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做免疫沉淀时,如果靶蛋白大小刚好在重链附近(50~55kDa)或轻链附近(~30kDa)时,显影后不太好区分到底是靶蛋白、还仅仅是抗体的重链/轻链。 本人目前做法:采用HRP-ProA和鼠抗兔轻链二抗,两种替换使用:靶蛋白如果在重链附近,就用鼠抗兔轻链二抗(理论上只结合轻链,但实际上还是对重链有一些结合); 靶蛋白如果在轻链附近或其他大小,就用HRP-ProA(理论上对轻链结合非常弱,但实际上还是比较强)。 不知各位有什么更好的解决办法吗? |
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siriusxuan
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