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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

[求助] 磷脂的薄层色谱 已有3人参与

请问要做大豆磷脂酰胆碱的薄层色谱   也就是把PC和PE,PI分开,应该选什么展开剂   我之前用的展开剂是氯仿:甲醇:水 体积比是65:25:4  文献上都这么写的  可是我的就没有分开  为什么,还有其他更好的展开剂吗

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雨雪寒天

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
赖皮皮: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-12-25 07:34:54
你用的那个展开剂估计好多人用过都不行,可以试下下面这个方法
      该方法的步骤为:
1、TLC板处理:先将活化后的TLC板用含1.8%硼酸的乙醇溶液浸泡,完全泡湿后取出放通风橱中晾干5min,再放置在100℃的烘箱中烘15min,自然冷却后取出备用;
2、展开剂:氯仿/甲醇/水/三乙胺(30/35/7/35, v/v/v/v);
3、显色:不能用碘染色,我们是用2,7-二氯荧光素;
注意事项:
1、TLC板处理时需比较小心,应避免硅胶脱落;
2、要让这几类磷脂完全跑开,选择用较长的板子效果较好,我们一般用10×20cm的板子让它跑20cm上去。
3、该展层剂展开时间较长(移动速度较慢),我们有选用默克的硅胶板可稍微加快速度,因为他家的板子比国产的要薄一点。

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梦不是用来做的,而是用来实现的!
8楼2015-12-22 23:30:33
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查看全部 9 个回答

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
赖皮皮(99503102代发): 金币+2, 谢谢专家的热心解答! 2015-12-21 09:33:59
文献上的你都信
1.展开剂的物质基本都那些,比如你可以尝试把氯仿换成冰乙酸等。
2.展开剂各物质之间的比例可以调整,这个很重要。我以前做低聚麦芽糖的TLC,赛选优化展开剂整整2周,文献上的看看就行,别太当真。祝顺利

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-12-21 09:09:53
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
赖皮皮: 金币+2, ★有帮助 2015-12-21 14:24:49
百度百科是这么说的:
在磷脂各种组分中,PC在醇中的溶解度比PE及PI高,据此可分离出PC。进一步通过氧化铝等处理可得到高含量的磷脂酰胆碱。通常使用的分离溶剂是C1~C4的低级醇类,如甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇等。用90%的乙醇对PC/PE=1.2的天然磷脂进行萃取,可以得到PC/PE=8的高PC产品。为了得到更高浓度,还可以用吸附剂分馏法或色谱分离法。。用丙二醇提取,加入柠檬酸可制得食用固体磷脂。用异丙醇分离效果好,但溶剂用量大。
这都已经工业化了吧。卵磷脂,产品都好多了。所以建议你再参考几篇文献。另外可以适当调节下氯仿和甲醇的比例。实在不行换BAW体系。
3楼2015-12-21 13:34:26
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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-21 09:09:53
文献上的你都信
1.展开剂的物质基本都那些,比如你可以尝试把氯仿换成冰乙酸等。
2.展开剂各物质之间的比例可以调整,这个很重要。我以前做低聚麦芽糖的TLC,赛选优化展开剂整整2周,文献上的看看就行,别太当真 ...

非常谢谢你    好几篇文献都那样写  说的跟真的一样   我就认真了   我先问问薄层色谱的展开剂都有哪些   什么样的溶剂可以做展开剂   我的磷脂是极性较弱的物质  我应该朝什么方向来换展开剂   还是根本就没有规律  需要自己挨个试试才能找到合适的展开剂呢

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4楼2015-12-21 14:22:34
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