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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

[求助] 磷脂的薄层色谱 已有3人参与

请问要做大豆磷脂酰胆碱的薄层色谱   也就是把PC和PE,PI分开,应该选什么展开剂   我之前用的展开剂是氯仿:甲醇:水 体积比是65:25:4  文献上都这么写的  可是我的就没有分开  为什么,还有其他更好的展开剂吗

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hc-material

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【答案】应助回帖

★ ★
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赖皮皮(99503102代发): 金币+2, 谢谢专家的热心解答! 2015-12-21 09:33:59
文献上的你都信
1.展开剂的物质基本都那些,比如你可以尝试把氯仿换成冰乙酸等。
2.展开剂各物质之间的比例可以调整,这个很重要。我以前做低聚麦芽糖的TLC,赛选优化展开剂整整2周,文献上的看看就行,别太当真。祝顺利

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2楼2015-12-21 09:09:53
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
赖皮皮: 金币+2, 有帮助 2015-12-21 14:24:49
百度百科是这么说的:
在磷脂各种组分中,PC在醇中的溶解度比PE及PI高,据此可分离出PC。进一步通过氧化铝等处理可得到高含量的磷脂酰胆碱。通常使用的分离溶剂是C1~C4的低级醇类,如甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇等。用90%的乙醇对PC/PE=1.2的天然磷脂进行萃取,可以得到PC/PE=8的高PC产品。为了得到更高浓度,还可以用吸附剂分馏法或色谱分离法。。用丙二醇提取,加入柠檬酸可制得食用固体磷脂。用异丙醇分离效果好,但溶剂用量大。
这都已经工业化了吧。卵磷脂,产品都好多了。所以建议你再参考几篇文献。另外可以适当调节下氯仿和甲醇的比例。实在不行换BAW体系。
3楼2015-12-21 13:34:26
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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-21 09:09:53
文献上的你都信
1.展开剂的物质基本都那些,比如你可以尝试把氯仿换成冰乙酸等。
2.展开剂各物质之间的比例可以调整,这个很重要。我以前做低聚麦芽糖的TLC,赛选优化展开剂整整2周,文献上的看看就行,别太当真 ...

非常谢谢你    好几篇文献都那样写  说的跟真的一样   我就认真了   我先问问薄层色谱的展开剂都有哪些   什么样的溶剂可以做展开剂   我的磷脂是极性较弱的物质  我应该朝什么方向来换展开剂   还是根本就没有规律  需要自己挨个试试才能找到合适的展开剂呢

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4楼2015-12-21 14:22:34
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 赖皮皮 at 2015-12-21 14:22:34
非常谢谢你    好几篇文献都那样写  说的跟真的一样   我就认真了   我先问问薄层色谱的展开剂都有哪些   什么样的溶剂可以做展开剂   我的磷脂是极性较弱的物质  我应该朝什么方向来换展开剂   还是根本就没有规律 ...

赛选展开剂就是确定展开剂极性的过程。就是调节比例,调物质找到合适的比例,可以做展开剂的容积基本都有机溶剂,你查看下TLC的基本理论原理,网上都有的,祝顺利。
5楼2015-12-21 14:28:04
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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zinfly at 2015-12-21 13:34:26
百度百科是这么说的:
在磷脂各种组分中,PC在醇中的溶解度比PE及PI高,据此可分离出PC。进一步通过氧化铝等处理可得到高含量的磷脂酰胆碱。通常使用的分离溶剂是C1~C4的低级醇类,如甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇等 ...

谢谢你  是的  已经工业化了   我现在很想知道有没有办法用薄层色谱鉴定出来我的样品中到底有没有PC.PE.PI等等   想让这几个成分分成几个点  可是不知道用什么样的展开剂才能做到

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6楼2015-12-21 14:29:34
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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-21 14:28:04
赛选展开剂就是确定展开剂极性的过程。就是调节比例,调物质找到合适的比例,可以做展开剂的容积基本都有机溶剂,你查看下TLC的基本理论原理,网上都有的,祝顺利。...

好的 我去查查   谢谢你

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7楼2015-12-21 14:31:05
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雨雪寒天

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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赖皮皮: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-12-25 07:34:54
你用的那个展开剂估计好多人用过都不行,可以试下下面这个方法
      该方法的步骤为:
1、TLC板处理:先将活化后的TLC板用含1.8%硼酸的乙醇溶液浸泡,完全泡湿后取出放通风橱中晾干5min,再放置在100℃的烘箱中烘15min,自然冷却后取出备用;
2、展开剂:氯仿/甲醇/水/三乙胺(30/35/7/35, v/v/v/v);
3、显色:不能用碘染色,我们是用2,7-二氯荧光素;
注意事项:
1、TLC板处理时需比较小心,应避免硅胶脱落;
2、要让这几类磷脂完全跑开,选择用较长的板子效果较好,我们一般用10×20cm的板子让它跑20cm上去。
3、该展层剂展开时间较长(移动速度较慢),我们有选用默克的硅胶板可稍微加快速度,因为他家的板子比国产的要薄一点。

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梦不是用来做的,而是用来实现的!
8楼2015-12-22 23:30:33
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赖皮皮

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:
8楼: Originally posted by 雨雪寒天 at 2015-12-22 23:30:33
你用的那个展开剂估计好多人用过都不行,可以试下下面这个方法
      该方法的步骤为:
1、TLC板处理:先将活化后的TLC板用含1.8%硼酸的乙醇溶液浸泡,完全泡湿后取出放通风橱中晾干5min,再放置在100℃的烘箱中烘 ...

非常谢谢你  我下来试试

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9楼2015-12-25 07:35:16
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