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SorryJ

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
20楼: Originally posted by wanglixia815 at 2015-12-21 00:05:21
没有测od的仪器
...

你目的片段有多大啊？看你引物能扩出条带来，应该能用，可以选择合适浓度的胶再试一试，记得煮胶的时候，偶尔晃动瓶子，看到液体清澈如水了，你再边晃动瓶子边用冷水冲冲瓶子，最后上染料，倒胶。感觉是你胶有问题。

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21楼2015-12-21 00:29:21
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wanglixia815

新虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by wanglixia815 at 2015-12-21 00:05:21
没有测od的仪器
...

400到900bp的样子，但是我的marker很清楚啊。如果胶有问题，marker也模糊吧

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有点矛盾。有点纠结
22楼2015-12-21 00:32:30
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gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
18楼: Originally posted by wanglixia815 at 2015-12-20 23:44:28
这就是灭过以后做的，但是我在稀释引物的时候，mili q 没有灭，是不这个原因
...

我觉得可能性很小。。一般试剂盒附带的无菌水只要不是经常用 又隔很久的话 都不会有什么问题。 你有重复试验吗 是重复了都一样情况么？ 不过话说你这间隔已经快两年时间了还用原来的稀释引物啊。。引物母液应该有吧 重新稀释一下比较保险吧。。如果是我的话，我会重复一下实验 同时拿个引物母液稀释一下一起PCR，这样就知道问题出在哪了，如果条带还是不行，那问题应该出在你的体系和反应条件了，你试试。
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23楼2015-12-21 17:48:35
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wanglixia815

新虫 (正式写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by gnot_nail at 2015-12-21 17:48:35
我觉得可能性很小。。一般试剂盒附带的无菌水只要不是经常用 又隔很久的话 都不会有什么问题。 你有重复试验吗 是重复了都一样情况么？ 不过话说你这间隔已经快两年时间了还用原来的稀释引物啊。。引物母液应该有吧 ...

这个引物就是引物母液稀释的，我先把粉末稀释到100uM一直在零下20度

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有点矛盾。有点纠结
24楼2015-12-22 11:53:04
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足下客

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wanglixia815 at 2015-12-20 18:53:18
我没有ddw,我不知道ddw和mili Q到底差别在哪里...

ddW是双蒸水，mili Q是用纯水仪制出来的超纯水，都可以用来做PCR，这个不会有什么影响
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25楼2015-12-22 12:39:52
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足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by wanglixia815 at 2015-12-21 00:05:21
没有测od的仪器
...

分光光度计没有吗？
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26楼2015-12-22 12:40:32
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Rational-zxs

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不是水的问题，也不是胶的问题。可能污染了或者降解了。
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真诚
27楼2015-12-22 15:30:06
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吗子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

胶和引物没有问题，你可以换酶试一下。
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深秋
28楼2015-12-22 16:29:48
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wanglixia815

新虫 (正式写手)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 足下客 at 2015-12-22 12:40:32
分光光度计没有吗？...

是测氮的

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有点矛盾。有点纠结
29楼2015-12-22 17:16:10
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wanglixia815

新虫 (正式写手)
引用回帖:
28楼: Originally posted by 吗子 at 2015-12-22 16:29:48
胶和引物没有问题，你可以换酶试一下。

酶是新买的，和去年用的是一样的，mytaqmix

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有点矛盾。有点纠结
30楼2015-12-22 17:17:13
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