应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变
51/1返回列表
查看: 716  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dra04

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变

用构建好的质粒做模板，在做定点突变时，一个模板虽然目的位点成功突变，但在距离突变位点大约60、140的碱基处也发生了突变；另一个模板也成功突变，但在突变位点大约25bp处插入了不到50个碱基，请求各位大神各位解答一下哈？目的质粒大约不到6000bp
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
娃哈哈
1楼 2015-12-17 21:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)
换高质量的酶，，用好的KIT 作
赞一下 回复此楼
努力的小蜜蜂
2楼2015-12-20 11:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一下，就是我从文库中PCR出来DNA片段，用了宝生物的Hs Taq、ExTaq Mix、Primestar HS三种酶，肝和肾的两种文库，然后切胶回收，连接T载体，挑单克隆测序，结果与NCBI上查得序列有1～4个碱基的突变。每个单克隆之间的突变都不一样，导致相应的氨基酸也改变了，这应该怎么办啊？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
3楼2016-01-07 21:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一个问题，我从文库中PCR出目的基因片段，肝和肾两种文库，宝生物的Hs Taq、 ExTaq、 Primestar HS三种酶，退火60度，然后切胶回收，用的Golden View，连接T载体，挑取单克隆，测序结果显示每个单克隆都有1～4个碱基突变，互相之间的突变碱基位置也不同，导致相应氨基酸改变。测序峰图比较好。我应该怎么办？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
4楼2016-01-07 21:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七琦绮弃

新虫 (初入文坛)
我最近实验也出现了类似问题，请问楼主有解决吗
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-09 20:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dra04 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 310求调剂 +13 666真好 2026-04-11 15/750 2026-04-13 12:16 by 蓝云思雨
[考研] 材料085601调剂 +30 何润采123 2026-04-10 32/1600 2026-04-13 09:51 by szhize
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +9 电气李 2026-04-13 10/500 2026-04-13 09:31 by fqwang
[考研] 271求调剂 +23 2261744733 2026-04-11 23/1150 2026-04-13 08:48 by 学zh
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 化学工程调剂289 +44 yang婷 2026-04-07 50/2500 2026-04-12 02:36 by 秋豆菜芽
[考研] 一志愿厦大0856，306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +18 ioodiiij 2026-04-08 18/900 2026-04-11 20:25 by liyun12321
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 调剂 +4 电气300求调剂不 2026-04-08 7/350 2026-04-11 10:44 by 紫曦紫棋
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-06 10/500 2026-04-11 10:36 by 紫曦紫棋
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +9 天下ww 2026-04-09 9/450 2026-04-10 22:58 by Ftglcn90
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 338求调剂 +8 wxygxsaaaaa 2026-04-06 8/400 2026-04-08 06:58 by 无际的草原
[考研] 生物医药调剂｜SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭