应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变
51/1返回列表
查看: 706  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dra04

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变

用构建好的质粒做模板，在做定点突变时，一个模板虽然目的位点成功突变，但在距离突变位点大约60、140的碱基处也发生了突变；另一个模板也成功突变，但在突变位点大约25bp处插入了不到50个碱基，请求各位大神各位解答一下哈？目的质粒大约不到6000bp
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
娃哈哈
1楼 2015-12-17 21:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)
换高质量的酶，，用好的KIT 作
赞一下 回复此楼
努力的小蜜蜂
2楼2015-12-20 11:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一下，就是我从文库中PCR出来DNA片段，用了宝生物的Hs Taq、ExTaq Mix、Primestar HS三种酶，肝和肾的两种文库，然后切胶回收，连接T载体，挑单克隆测序，结果与NCBI上查得序列有1～4个碱基的突变。每个单克隆之间的突变都不一样，导致相应的氨基酸也改变了，这应该怎么办啊？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
3楼2016-01-07 21:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一个问题，我从文库中PCR出目的基因片段，肝和肾两种文库，宝生物的Hs Taq、 ExTaq、 Primestar HS三种酶，退火60度，然后切胶回收，用的Golden View，连接T载体，挑取单克隆，测序结果显示每个单克隆都有1～4个碱基突变，互相之间的突变碱基位置也不同，导致相应氨基酸改变。测序峰图比较好。我应该怎么办？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
4楼2016-01-07 21:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七琦绮弃

新虫 (初入文坛)
我最近实验也出现了类似问题，请问楼主有解决吗
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-09 20:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dra04 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 5/250 2026-03-25 00:20 by 元夕元
[考研] 0854电子信息求调剂 +6 α____ 2026-03-22 7/350 2026-03-24 19:46 by sunjie8888
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 081700 调剂 267分 +9 迷人的哈哈 2026-03-23 9/450 2026-03-24 11:58 by 544594351
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +3 Promise-jyl 2026-03-23 3/150 2026-03-23 13:43 by wangkm
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭