应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变
51/1返回列表
查看: 705  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dra04

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变

用构建好的质粒做模板，在做定点突变时，一个模板虽然目的位点成功突变，但在距离突变位点大约60、140的碱基处也发生了突变；另一个模板也成功突变，但在突变位点大约25bp处插入了不到50个碱基，请求各位大神各位解答一下哈？目的质粒大约不到6000bp
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
娃哈哈
1楼 2015-12-17 21:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)
换高质量的酶，，用好的KIT 作
赞一下 回复此楼
努力的小蜜蜂
2楼2015-12-20 11:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一下，就是我从文库中PCR出来DNA片段，用了宝生物的Hs Taq、ExTaq Mix、Primestar HS三种酶，肝和肾的两种文库，然后切胶回收，连接T载体，挑单克隆测序，结果与NCBI上查得序列有1～4个碱基的突变。每个单克隆之间的突变都不一样，导致相应的氨基酸也改变了，这应该怎么办啊？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
3楼2016-01-07 21:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一个问题，我从文库中PCR出目的基因片段，肝和肾两种文库，宝生物的Hs Taq、 ExTaq、 Primestar HS三种酶，退火60度，然后切胶回收，用的Golden View，连接T载体，挑取单克隆，测序结果显示每个单克隆都有1～4个碱基突变，互相之间的突变碱基位置也不同，导致相应氨基酸改变。测序峰图比较好。我应该怎么办？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
4楼2016-01-07 21:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七琦绮弃

新虫 (初入文坛)
我最近实验也出现了类似问题，请问楼主有解决吗
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-09 20:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dra04 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 招08考数学 +7 laoshidan 2026-03-20 16/800 2026-03-24 17:52 by 乌拉儿山脉
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭