应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变
51/1返回列表
查看: 685  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dra04

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在做定点突变时，有其他位点碱基发生突变

用构建好的质粒做模板，在做定点突变时，一个模板虽然目的位点成功突变，但在距离突变位点大约60、140的碱基处也发生了突变；另一个模板也成功突变，但在突变位点大约25bp处插入了不到50个碱基，请求各位大神各位解答一下哈？目的质粒大约不到6000bp
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
娃哈哈
1楼 2015-12-17 21:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)
换高质量的酶，，用好的KIT 作
赞一下 回复此楼
努力的小蜜蜂
2楼2015-12-20 11:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一下，就是我从文库中PCR出来DNA片段，用了宝生物的Hs Taq、ExTaq Mix、Primestar HS三种酶，肝和肾的两种文库，然后切胶回收，连接T载体，挑单克隆测序，结果与NCBI上查得序列有1～4个碱基的突变。每个单克隆之间的突变都不一样，导致相应的氨基酸也改变了，这应该怎么办啊？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
3楼2016-01-07 21:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dra04

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-20 11:40:14
换高质量的酶，，用好的KIT 作

好的，谢谢。我还想问一个问题，我从文库中PCR出目的基因片段，肝和肾两种文库，宝生物的Hs Taq、 ExTaq、 Primestar HS三种酶，退火60度，然后切胶回收，用的Golden View，连接T载体，挑取单克隆，测序结果显示每个单克隆都有1～4个碱基突变，互相之间的突变碱基位置也不同，导致相应氨基酸改变。测序峰图比较好。我应该怎么办？
赞一下 回复此楼
娃哈哈
4楼2016-01-07 21:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七琦绮弃

新虫 (初入文坛)
我最近实验也出现了类似问题，请问楼主有解决吗
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-09 20:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dra04 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 材料学调剂 +8 提神豆沙包 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:14 by peike
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭