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请教电泳跑胶电压和时间 已有1人参与
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大家好，我刚接触分子生物学，提取的DNA片段应该在15000bp以上，电泳用的宝生物的15000bp marker，按理说有7条条带，为何我跑出来只有3条呢？跑胶电压140V，浓度1%（0.25g琼脂糖，25mL 0.5倍TBE），可能加热过程有挥发，浓度实际比1%高，跑胶时间35min，前面蓝色的条带已经跑到了胶中间。 我问过生物专业的同学大多电压不超过110,但我之前一直用1%的胶，180V，跑20min，如果目的片段只有100~500bp，条件180V,20min，胶浓度1%可以吗？100bp和150bp的片段，1%的胶180V 20min可以区分开吗？谢谢大家！   20151217DNAtiqu.jpg |
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glove94
木虫 (小有名气)
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按照平时做实验，片段越大，比如基因片段，就用1%的胶，不过TBE的浓度是1×的，如果是PCR产物，一般只有几百bp的，就用1.5%的胶。电压太大，比如150V，条带可能会冲的比较厉害，跑胶时间不要太长。我一般用120V电压，跑23～26分钟 发自小木虫Android客户端 |
23楼2015-12-19 00:39:40
2楼2015-12-17 18:21:47
3楼2015-12-17 23:16:29
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你按照marker说明书里面的条件跑，才能出来相似的结果，不要太盲目。此外一百多的，如果各条带差异小，就要用4%左右的，跑的45min才能好看 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-12-17 23:23:47