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humants金虫 (正式写手)
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[求助]Ni柱选择
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[求助]Ni柱选择。 各位虫友，大家好，我在做原核表达，sds-page显示蛋白已经表达，下面打算做纯化。 我的蛋白在设计的时候加上了6×his tag，所以我打算用Ni柱去纯化，纯化后打算复性做活性测定，所以想让他纯度大一点，但是我不知道选哪类的Ni柱，市售的有IDA和NTA？所以我打算问一下几个问题。注：我的蛋白分子量36KDa，pI=6.32，表达量占总蛋白的约20% 1.我是选择IDA的还是NTA？ 2.是应该买预装柱的还是直接买填料？是不是自己填料和与填料的效果差比啊很大？（我是新手，实验室也没有懂得...） 3.本人比较爱国，呵呵...打算买国产的，不知道哪家的比较耐用？ 恳请大家的解答，先谢谢了。 |
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