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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 还原响应载药胶束体外释放实验总是失败-释放率很低。
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bbsoslolita

银虫 (小有名气)

[求助] 还原响应载药胶束体外释放实验总是失败-释放率很低。 已有2人参与

大家好，最近我一直在做还原响应的载药胶束的体外缓释实验，但是结果都很不好，在还原性条件下的和不在还原性条件下的、具有还原响应性和不具还原响应性的胶束的释放率都差不多，而且DTT做的释放率很低，48h还不到10%。
我的实验方法：
4mL 1mg/mL的载药胶束溶液装入透析袋，透析袋外面加46mL PBS7.4透析液，DTT作为还原剂，浓度为0，或者是10mM。
实验在37摄氏度下进行，透析袋方面放置了搅拌子搅拌，每隔一段时间取样，补充透析液。样品测试UV，绘制成缓释曲线。
我不知道是不是由以下原因引起的：
1. 胶束溶液浓度太高，导致DOX释放不出来，或者是扩散地很慢。我看文献上有跟我差不多的，1mg/mL,也有很低的，0.025mg/mL。我是用UV测DOX释放量的，在1mg/mL的浓度下UV的测试已经捉襟见肘了，如果要在极低浓度下进行，恐怕要用荧光光谱仪来测试。
2. 没有使用摇床，因为没有条件，所以改成了透析袋外搅拌子搅拌，我的胶束是由两亲性的聚合物构成的，疏水端由二硫键交联。打开交联后，亲疏水聚合物可能还是组成胶束，没有解离，再加上没有摇床震荡，所以药物出来很慢。
3. 还原剂的问题。最初使用的是GSH来还原，但是发现透析液中会出现白色絮状的沉淀，可能是GSH在37摄氏度下会变质，这沉淀影响了紫外吸收，抬高了基线，使得释放率超出了理论值。后来我改成了DTT，发现DTT做出来的释放率很低，48h不到10%，还没有GSH做出来的高（48h 30%左右，但没有排除沉淀吸收的影响），就算是没有加DTT的都有4%，难道是DTT变质了？
问题比较麻烦，请了解的虫友和前辈多多指点，感激不尽。
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1楼 2015-12-16 10:27:27
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bbsoslolita

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by qwe0907123 at 2016-01-11 21:36:58
你好，你的4ml的胶束溶液和46ml的PBS缓冲液，这两个体积是怎么确定的？

一方面是跟实验室条件结合，体积相加50mL刚好可以没过放在50mL烧杯中的透析袋并让透析夹固定不动。
一方面是参考文献中两者的体积，透析袋外面的透析液足够多以满足漏槽效应，还要考虑透析袋内的胶束含量使得以后释放出来的药物可以检测得出来。
需要注意的是，我以前采用胶束溶液的浓度为1mg/mL，这个过高，不满足漏槽效应，所以现在改成0.2mg/mL,效果还可以。你可以考虑一下。
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8楼2016-01-12 15:39:20
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gege123

铁虫 (小有名气)
一方面是参考文献中两者的体积，透析袋外面的透析液足够多以满足漏槽效应，还要考虑透析袋内的胶束含量使得以后释放出来的药物可以检测得出来。
需要注意的是，我以前采用胶束溶液的浓度为1mg/mL，这个过高，不满足漏槽效应，所以现在改成0.2mg/mL,效果还可以。你可以考虑一下。


你的文献能共享吗?谢谢！
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StayHungry,StayFoolish
10楼2016-03-01 16:53:52
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普通回帖

bbsoslolita

银虫 (小有名气)
江湖救急啊。
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2楼2015-12-17 18:53:56
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bbsoslolita

银虫 (小有名气)
呜呜呜~~~
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3楼2015-12-19 12:23:39
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lx815744820

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.建议用GSH，因为你要和制剂在体内的环境相对应，而且你用GSH的效果不错，那个沉淀没有包含红色的药物就没有问题。
2.DTT的量会不会加少了？
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Whereisawill，thereisaway！
4楼2016-01-08 09:13:18
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bbsoslolita

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lx815744820 at 2016-01-08 09:13:18
1.建议用GSH，因为你要和制剂在体内的环境相对应，而且你用GSH的效果不错，那个沉淀没有包含红色的药物就没有问题。
2.DTT的量会不会加少了？

啊，谢谢你了，我现在是用GSH在做，然后导致问题的原因现在锁定在双键和GSH发生反应所导致。
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5楼2016-01-08 15:57:17
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qwe0907123

木虫 (正式写手)
6楼2016-01-11 21:24:58
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qwe0907123

木虫 (正式写手)
你好，你的4ml的胶束溶液和46ml的PBS缓冲液，这两个体积是怎么确定的？
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7楼2016-01-11 21:36:58
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qwe0907123

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by bbsoslolita at 2016-01-12 15:39:20
一方面是跟实验室条件结合，体积相加50mL刚好可以没过放在50mL烧杯中的透析袋并让透析夹固定不动。
一方面是参考文献中两者的体积，透析袋外面的透析液足够多以满足漏槽效应，还要考虑透析袋内的胶束含量使得以后 ...

蟹蟹！

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9楼2016-01-13 09:23:45
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