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bbsoslolita银虫 (小有名气)
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还原响应载药胶束体外释放实验总是失败-释放率很低。 已有2人参与
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大家好,最近我一直在做还原响应的载药胶束的体外缓释实验,但是结果都很不好,在还原性条件下的和不在还原性条件下的、具有还原响应性和不具还原响应性的胶束的释放率都差不多,而且DTT做的释放率很低,48h还不到10%。 我的实验方法: 4mL 1mg/mL的载药胶束溶液装入透析袋,透析袋外面加46mL PBS7.4透析液,DTT作为还原剂,浓度为0,或者是10mM。 实验在37摄氏度下进行,透析袋方面放置了搅拌子搅拌,每隔一段时间取样,补充透析液。样品测试UV,绘制成缓释曲线。 我不知道是不是由以下原因引起的: 1. 胶束溶液浓度太高,导致DOX释放不出来,或者是扩散地很慢。我看文献上有跟我差不多的,1mg/mL,也有很低的,0.025mg/mL。我是用UV测DOX释放量的,在1mg/mL的浓度下UV的测试已经捉襟见肘了,如果要在极低浓度下进行,恐怕要用荧光光谱仪来测试。 2. 没有使用摇床,因为没有条件,所以改成了透析袋外搅拌子搅拌,我的胶束是由两亲性的聚合物构成的,疏水端由二硫键交联。打开交联后,亲疏水聚合物可能还是组成胶束,没有解离,再加上没有摇床震荡,所以药物出来很慢。 3. 还原剂的问题。最初使用的是GSH来还原,但是发现透析液中会出现白色絮状的沉淀,可能是GSH在37摄氏度下会变质,这沉淀影响了紫外吸收,抬高了基线,使得释放率超出了理论值。后来我改成了DTT,发现DTT做出来的释放率很低,48h不到10%,还没有GSH做出来的高(48h 30%左右,但没有排除沉淀吸收的影响),就算是没有加DTT的都有4%,难道是DTT变质了? 问题比较麻烦,请了解的虫友和前辈多多指点,感激不尽。 |
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