应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒大提浓度很低，怎么办？
151/2返回列表12下一页
查看: 11583  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

苏三加油没

木虫 (初入文坛)

[求助] 质粒大提浓度很低，怎么办？ 已有7人参与

摇菌1ml4小时后，转到100ml LB+amp的培养液中37度18小时，中提，加50ulDEPC水溶解，浓度只有90ng/ul.之前，实验室别人提质粒都是1ug/ul，换过新的LB+amp的培养基，还是浓度太低，怎么解决？需要中提获得大量质粒，急求！
回复此楼

» 猜你喜欢
生而无憾，活得精彩
1楼 2015-12-16 01:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

amandav108

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

拷贝低的质粒， 我是5ml 8小时 500-1000ml 16-18小时，用大提试剂盒最好有指示剂 可以看到裂解充不充分，同样的质粒用小提试剂盒效果却非常差
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2015-12-29 16:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

川大太行

金虫 (正式写手)
最后洗脱液是什么？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
不惧不惑向阳而生
2楼2015-12-23 16:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苏三加油没

木虫 (初入文坛)
灭菌水

发自小木虫Android客户端
回复此楼
生而无憾，活得精彩
3楼2015-12-24 02:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwmhxy

木虫 (初入文坛)
转摇比例大一点，可以先转摇10ml的，再转摇100的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
遇一人白首，择一城终老
4楼2015-12-24 09:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大脸猫ld

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的质粒本身拷贝数和别人的一样吗？拷贝数不好的话就只能加大菌液量了。
赞一下 回复此楼
5楼2015-12-24 10:55:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

质粒拷贝低需要加大菌液量，相应的也要提高试剂量。裂解不充分也会出现提取低，可以试试换一下裂解液。还有可以试试把培养基改变一下浓度。使营养富集。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
6楼2015-12-24 11:21:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以试试将质粒转化后挑斑摇菌，再扩大培养
赞一下 回复此楼
8楼2015-12-29 17:13:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Merrylegs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

个人经验，跟试剂盒有很大关系，我只发现Axygen（现归属Corning）的大提试剂盒效果好，100mL菌液（非低拷贝质粒）可以提取400-600μg的质粒DNA。国内某品牌的试剂盒提取量只有＜100μg。
赞一下 回复此楼
9楼2015-12-30 09:56:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兽医做科研

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

那就要看你的质粒是低拷贝还是高拷贝了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2015-12-30 17:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 苏三加油没 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料学硕318求调剂 +6 February_Feb 2026-03-01 8/400 2026-03-01 15:28 by YYYYX1234
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 材料学调剂 +8 提神豆沙包 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:14 by peike
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 0856求调剂285 +6 吕仔龙 2026-02-28 6/300 2026-03-01 10:03 by wang_dand
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭