| 查看: 2257 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
western 检测tubulin，imageJ无法识别后面5个条带。
|
||
|
大家好，我刚做western blot ，用ECL曝tubulin（42kD），曝光10s，条带有亮有浅。用imageJ检测灰度， 问题来了：浅色条带可以用魔棒（wand）检测出来，而后面亮的条带无法用wand检测，圈框大小一致，请问是什么原因呢？ 我同时用imageJ检测了同一张膜上的pMLC（18kD），也是后面的5个条带无法检测，请大家指点。 western条件：20ug上样量，垂直电泳（90V，20min；125V 至胶底），半干转40mA 、30min，5%Blocker 的TBST 室温封闭1-1.5h，一抗过夜，TBST 5min洗3次，二抗室温封闭1h，TBST 5min洗3次，ECL处理5min，曝光时间为5s、10s、自动，做过几次，结果条带都不好，请大家指点。  tubulin 自动曝光（1.5min） 20151212_122522_Ch+Marker.jpg  pMLC 自动曝光（1.5min） 20151212_121417_Ch+Marker.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
285求调剂
已经有6人回复
-
085701环境工程求调剂
已经有6人回复
-
291求调剂
已经有6人回复
-
315分求调剂
已经有6人回复
-
277跪求调剂
已经有8人回复
-
295求调剂
已经有5人回复
-
295材料工程专硕求调剂
已经有3人回复
-
083000学硕274求调剂
已经有4人回复
-
275求调剂
已经有8人回复
-
一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂
已经有8人回复
 本帖仅楼主可见 |
8楼2015-12-21 23:52:11
晴天1882
木虫 (正式写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 4077.5
- 散金: 18
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 647
- 在线: 424.3小时
- 虫号: 744363
- 注册: 2009-04-09
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
2楼2015-12-14 15:51:18
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-12-14 15:59:30
4楼2015-12-14 18:21:42
