24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1132  |  回复: 10
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

董文娟

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】pMD18-T转化大肠杆菌

最近在做pMD18-T转化大肠杆菌,做了两次
第一次转 一个菌都没有长(可能抗生素的浓度有问题)
第二次转 12小时后没有长 但当培养了17小时后,发现平板上密密麻麻都是菌
第一次转和第二次转操作区别有两点
一、收集一小时培养的菌液所用转速不同(第一次5000,第二次4000,均离心2分钟)
二、热激后冰浴时间不同(第一次4分钟,第二次5-6分钟)
想请教:第二次平板上为什么会出现那么多菌,而12H时根本没有?




有时候平板上会长很多的小点点(与统一平板中的菌落比起来很小),师姐说是什么DNA。。。。有没有人遇到这种情况?那到底是什么?造成这种现象的原因是什么?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

董文娟

金虫 (小有名气)

谢谢大家

谢谢大家
所用菌种是DH5a
现在我怀疑两次用的平板中的AMP浓度是不一样的
因为是很久之前倒的平板

弱弱地问下:卫星菌落 是什么?
                 平板放于4度太久,抗生素会不会分解?或失去作用效果?
9楼2008-09-23 20:27:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

xipha

木虫 (正式写手)

问下宿主菌是什么株?抗生素终浓度多少?
2楼2008-09-22 21:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-15 12:36
可能你的菌株就是要到12小时才长;也有可能不是你要的菌,在12小时后开始长杂菌,太小的密密麻麻的很有可能不是你要的菌。这些跟你的抗生素的终浓度有关系的。还有就是转化效率,有时候就长两三个菌落,可就是目的菌。
活着就要让人感受到你的存在。
3楼2008-09-22 22:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superarm

金虫 (正式写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-15 12:36
一、收集一小时培养的菌液所用转速不同(第一次5000,第二次4000,均离心2分钟)
二、热激后冰浴时间不同(第一次4分钟,第二次5-6分钟)
这两点没啥区别,不影响试验,把第二次筛下菌就知道是不是阳性克隆了。
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋!
4楼2008-09-23 10:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +8 zhubinhao 2026-03-27 8/400 2026-03-27 11:46 by Wushiqi17
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +3 IceGuo 2026-03-26 4/200 2026-03-27 05:35 by user003
[考研] 食品工程专硕求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 3/150 2026-03-27 01:14 by dgnhs
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见