24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1131  |  回复: 10
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

董文娟

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】pMD18-T转化大肠杆菌

最近在做pMD18-T转化大肠杆菌,做了两次
第一次转 一个菌都没有长(可能抗生素的浓度有问题)
第二次转 12小时后没有长 但当培养了17小时后,发现平板上密密麻麻都是菌
第一次转和第二次转操作区别有两点
一、收集一小时培养的菌液所用转速不同(第一次5000,第二次4000,均离心2分钟)
二、热激后冰浴时间不同(第一次4分钟,第二次5-6分钟)
想请教:第二次平板上为什么会出现那么多菌,而12H时根本没有?




有时候平板上会长很多的小点点(与统一平板中的菌落比起来很小),师姐说是什么DNA。。。。有没有人遇到这种情况?那到底是什么?造成这种现象的原因是什么?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superarm

金虫 (正式写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-15 12:36
一、收集一小时培养的菌液所用转速不同(第一次5000,第二次4000,均离心2分钟)
二、热激后冰浴时间不同(第一次4分钟,第二次5-6分钟)
这两点没啥区别,不影响试验,把第二次筛下菌就知道是不是阳性克隆了。
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋!
4楼2008-09-23 10:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

xipha

木虫 (正式写手)

问下宿主菌是什么株?抗生素终浓度多少?
2楼2008-09-22 21:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-15 12:36
可能你的菌株就是要到12小时才长;也有可能不是你要的菌,在12小时后开始长杂菌,太小的密密麻麻的很有可能不是你要的菌。这些跟你的抗生素的终浓度有关系的。还有就是转化效率,有时候就长两三个菌落,可就是目的菌。
活着就要让人感受到你的存在。
3楼2008-09-22 22:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-15 12:36
amp 的浓度一般为100mg/L 转化放在冰上的时间没有影响 离不离心都可以
你可以用蓝白筛选 只有有蓝白斑说明你长的菌就是正常的
如果你抗生素浓度高 菌斑出现的时间就会长一点
5楼2008-09-23 11:07:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +4 新时代材料 2026-03-27 4/200 2026-03-27 14:46 by wangjihu
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 食品工程专硕求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 3/150 2026-03-27 01:14 by dgnhs
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +9 holy J 2026-03-21 9/450 2026-03-26 15:47 by 161765490
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗? +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
请填处理意见