24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 576  |  回复: 7
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 xuehu2008 的 5 个金币

xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[交流] 求助真核基因N端信号肽的去除

我看到文献上讲真核基因N端的信号肽是影响其在原核中表达的首要因素,因此要在克隆之前就从真核基因中设计引物,去除信号肽序列。
可我要克隆的基因如果去除信号肽序列,那么其N端就不是甲硫氨酸的密码子了,那么如果构建进表达载体的话其大肠杆菌的转录起始系统怎么能够识别呢?
请高手指点!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boouy

银虫 (正式写手)

大肠杆菌表达系统中有Met啊,都是融和表达系统,因此ORF要In Frame。
2楼2008-09-22 10:34:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuehu2008

铜虫 (正式写手)

哦,如果是这样的话,目标蛋白的N端和C端岂不是都带了几个附加的氨基酸,会影响其生物学功能吗?
3楼2008-09-22 13:27:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boouy

银虫 (正式写手)

大家都这么做,也许有影响,姑且不考虑吧。
4楼2008-09-23 08:17:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuehu2008

铜虫 (正式写手)

哦。好的,谢谢诸位阿!
5楼2008-09-23 11:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyk_527

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xuehu2008 at 2008-9-22 13:27:
哦,如果是这样的话,目标蛋白的N端和C端岂不是都带了几个附加的氨基酸,会影响其生物学功能吗?

N端可以在MET和你所要的序列之间添加蛋白酶切位点,如EK酶的,这样后期可以将met切掉,C端你自己加上终止密码子怎么会多出来氨基酸呢
6楼2008-09-23 12:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuehu2008

铜虫 (正式写手)

zyk_527 说得很有道理,谢谢啊!
7楼2008-09-24 23:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mark32280667806

我可以帮助你表达蛋白,一个氨基酸都不多,需要的话,可以联系我!!!
8楼2008-09-29 12:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuehu2008 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料292调剂 +9 橘颂思美人 2026-03-23 9/450 2026-03-27 08:16 by hypershenger
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 286求调剂 +3 lim0922 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:07 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 279求调剂 +6 红衣隐官 2026-03-21 6/300 2026-03-26 18:32 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂推荐 +4 清酒714 2026-03-26 5/250 2026-03-26 17:49 by fmesaito
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见