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荧光定量引物pcr引物设计验证
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要同时做多个基因的定量，计划是选择染料法，利用内参基因，采用相对定量的方法。 设计多对引物时，要考虑让各对引物的Tm值接近吗？扩出来的片段大小要相近吗？ 如果各对引物的最佳反应条件不一致，同时做多个基因的定量，是不是会对结果有影响？ 还有引物的验证问题，验证步骤是这样吗： 普通pcr后跑胶，切胶，胶回收，测序，与目的基因拟扩增片段比对。 荧光定量时，看溶解曲线，是否有引物二聚体。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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