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远丽123

金虫 (小有名气)

[求助] 同源重组的方法敲除目的基因 已有4人参与

我要对一个基因进行敲除,是利用同源重组的方法敲除目的基因,将两端同源臂搭起来构建重组质粒,后来送去测序 发现了有一个碱基错了 可能发生了点突变 请问各位大神  我还可以用这个用这个重组质粒进行下面实验吗 只是一个碱基错了 应该不会有太大影响吧

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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 远丽123 at 2015-12-10 10:50:35
多谢你的回答 对我很有用 测序出来的下游与我原序列相比多了一个碱基 我是担心会不会影响到下面一个基因的表达 应该不会有太大影响吧
...

如果 是用于下游表达,剩余的碱基有错误的那么最好是重新构建
本人论文期间是吃过亏的,非常浪费时间,出了问题排查问题得花不少时间
10楼2015-12-11 08:23:11
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